Mutazione puntiforme PCR overlappante

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Laura82
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 14 aprile 2010 : 11:24:23

Ragazzi una domanda..
nel caso di mutazioni puntiformi..nel primo ciclo della PCR over lappante ho bisogno di primer per effettuare l'amplificazione del frammento? Grazie...

Smichel
Nuovo Arrivato

36 Messaggi

Inserito il - 14 aprile 2010 : 18:59:41

Spiega meglio la tua domanda perchè posta così possono esserci diverse risposte in base a quello che stai facendo e che devi trovare.
Per esempio se vuoi sapere che tipo di mutazione puntiforme hai nel tuo campione ti serve un primer che abbia come ultima base al suo 3' la base complementare alla specifica mutazione che stai cercando.

GFPina
Moderatore

Città: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 14 aprile 2010 : 22:48:34

Sì non è molto chiaro quello che chiedi, comunque in per fare la PCR per forza devi avere dei primers, altrimenti come amplifichi?
Lo schema di inserzione di una mutazione puntiforme mediante overlapping PCR comunque è questo:

(preso da: http://www.ufrgs.br/depbiot/blaber/section5/section5.htm, dove trovi anche la spiegazione)