Buongiorno, qualcuno sa spiegarmi qual č il problema quando si ottengono curve di amplificazione (realtimePCR TaqMan) che in corrispondenza del ciclo soglia hanno un andamento "a zig zag"? Grazie
Decisamente non fornisci abbastanza informazioni per aiutarti: E' la prima volta che usi questi primer o sono vecchi? Li hai testati in una pcr normale per verificare che il prodotto ottenuto sia della lunghezza aspettata? La melting com'č? Ti succede con una coppia di primer o tutte?
Decisamente non fornisci abbastanza informazioni per aiutarti: E' la prima volta che usi questi primer o sono vecchi? Li hai testati in una pcr normale per verificare che il prodotto ottenuto sia della lunghezza aspettata? La melting com'č? Ti succede con una coppia di primer o tutte?
Scusa! Hai ragione...sto utilizzando un kit per diagnostica per cui non conosco sequenze di primers e sonda. Di solito questo kit funziona perfettamente, ma ogni tanto mi succede di ottenere le curve con andamento anomalo di cui parlavo sopra. Essendo un sistema "chiuso" non riesco a capire cosa poter fare per risolvere il problema. Tuttavia ho ripetuto la reazione cambiando il lotto del ROX e questa volta č andato tutto perfettamente. Comunque grazie mille e ...scusate la mia inesperienza ad usare il forum
Citazione:Messaggio inserito da PF01
Citazione:Messaggio inserito da domi84
Decisamente non fornisci abbastanza informazioni per aiutarti: E' la prima volta che usi questi primer o sono vecchi? Li hai testati in una pcr normale per verificare che il prodotto ottenuto sia della lunghezza aspettata? La melting com'č? Ti succede con una coppia di primer o tutte?
Non preoccuparti per il forum. Purtroppo questo e' il problema di usare i kit chiusi, non si hanno abbastanza informazioni per intervenire. La cosa buona e' che di solito c'č lo specialist che puoi chiamare.