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moi infezione virale laboratorio

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CheshireCat91
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 31 ottobre 2017 : 10:16:01

Salve a tutti,
sono una new entry.
A gennaio devo laurearmi devo eseguire degli esperimenti infettando delle colture cellulari con una MOI di 2.
Per contare le quante cellule per ml ho, uso un cell counter e del trypan blue. Ora, sapendo il numero di cellule per ml ( mettiamo ad esempio che ne abbia 5.43 x 10 alla sesta cells/ml)quanto virus devo mettere per infettare le fiasche, sapendo che il titolo virale � di 10 alla sesta?
( ho eseguito la titolazione con il METODO DELLA DILUIZIONE LIMITE).
Vi sarei molto grata se mi deste una mano perch� sono disperata...
poich� � da poco che frequento il laboratorio, vi chiedo di spiegare nella maniera pi� chiara possibile e guidandomi passo per passo.
Grazie a tutti quelli che risponderanno.
Un abbraccio, M.

Giuliano652
Moderatore

Prov.: Brescia

6940 Messaggi

Inserito il - 31 ottobre 2017 : 10:51:59

sono parecchio arrugginito sulle tecniche di lab, ma se non sbaglio una MOI di 2 vuol dire che devi usare due virioni per cellula, quindi se hai 5.43 x 10^6 cellule dovrai infettare con 1.09 x 10^7 virus (5.43 x 2 = 10.86)... quindi direi che devi trovare il modo di avere pi� virus per ml oppure diluire le cellule di almeno un fattore di 100, in modo da poter avere virus sovrabbondante, a quel punto ti servirebbero solo 1.09 x 10^5 virioni per 5.43 x 10^4 cellule

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