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PF01
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3 Messaggi

Inserito il - 31 luglio 2017 : 10:08:03  Mostra Profilo Invia a PF01 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Buongiorno,
qualcuno sa spiegarmi qual č il problema quando si ottengono curve di amplificazione (real time PCR TaqMan) che in corrispondenza del ciclo soglia hanno un andamento "a zig zag"?
Grazie

domi84
Moderatore

Smile3D

Cittā: Glasgow


1723 Messaggi

Inserito il - 31 luglio 2017 : 19:24:07  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Decisamente non fornisci abbastanza informazioni per aiutarti:
E' la prima volta che usi questi primer o sono vecchi? Li hai testati in una pcr normale per verificare che il prodotto ottenuto sia della lunghezza aspettata? La melting com'č? Ti succede con una coppia di primer o tutte?

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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PF01
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3 Messaggi

Inserito il - 01 agosto 2017 : 08:37:59  Mostra Profilo Invia a PF01 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da domi84

Decisamente non fornisci abbastanza informazioni per aiutarti:
E' la prima volta che usi questi primer o sono vecchi? Li hai testati in una pcr normale per verificare che il prodotto ottenuto sia della lunghezza aspettata? La melting com'č? Ti succede con una coppia di primer o tutte?

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PF01
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3 Messaggi

Inserito il - 01 agosto 2017 : 08:44:31  Mostra Profilo Invia a PF01 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scusa! Hai ragione...sto utilizzando un kit per diagnostica per cui non conosco sequenze di primers e sonda. Di solito questo kit funziona perfettamente, ma ogni tanto mi succede di ottenere le curve con andamento anomalo di cui parlavo sopra. Essendo un sistema "chiuso" non riesco a capire cosa poter fare per risolvere il problema. Tuttavia ho ripetuto la reazione cambiando il lotto del ROX e questa volta č andato tutto perfettamente. Comunque grazie mille e ...scusate la mia inesperienza ad usare il forum
Citazione:
Messaggio inserito da PF01

Citazione:
Messaggio inserito da domi84

Decisamente non fornisci abbastanza informazioni per aiutarti:
E' la prima volta che usi questi primer o sono vecchi? Li hai testati in una pcr normale per verificare che il prodotto ottenuto sia della lunghezza aspettata? La melting com'č? Ti succede con una coppia di primer o tutte?



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domi84
Moderatore

Smile3D

Cittā: Glasgow


1723 Messaggi

Inserito il - 02 agosto 2017 : 19:43:04  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non preoccuparti per il forum. Purtroppo questo e' il problema di usare i kit chiusi, non si hanno abbastanza informazioni per intervenire. La cosa buona e' che di solito c'č lo specialist che puoi chiamare.

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
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