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Autore

Discussione

RossaPonceau
Nuovo Arrivato

4 Messaggi

Inserito il - 22 gennaio 2016 : 23:23:50

Salve a tutti,
volevo chiedervi che metodo usavate per quantizzare le proteine per western blot.Mi hanno suggerito di fare cos�. In pratica:
-si legge il valore dell' assorbanza
-si divide per 2 (suppongo i microlitri di campione nella cuvetta)
-si divide poi ulteriormente per 0.059 ( credo il valore dell'assorbanza del Bradford diviso per 10.000)
- il numero ottenuto si divide per i gamma di campione che vogliamo ottenere ottenendo cos� i microlitri
Mi chiedevo ma...Perch� si usa questo calcolo? Si rif� a qualche legge?
Grazieeee

domi84
Moderatore

Citt�: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 24 gennaio 2016 : 13:08:40

Citazione:

-si divide poi ulteriormente per 0.059 ( credo il valore dell'assorbanza del Bradford diviso per 10.000)

No...dovresti fare una retta di taratura con una proteina a concentrazione nota (di solito albumina), calcolare la formula della retta e grazie a quella ricavare la concentrazione dei tuoi campioni.
Chi ti ha suggerito cos� ha approssimato che la tua retta dia un valore di 0.059
Non so se possa esserti utile, ti allego il foglio di calcolo che uso io

Allegato:

Calcoli.xls
16,21 KB

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
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