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 Biologia Molecolare
 differenziare le linea cellulare MEG-01 con TPO (100ng)
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Tag   MEG-01 cells    differenziamento delle piastrine    TPO    trombopoietina    megacariociti  Aggiungi Tag

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PIM3
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Inserito il - 26 aprile 2017 : 16:35:09  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di PIM3 Invia a PIM3 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Gentili utenti,

Al momento sto cercando di differenziare la linea cellulare MEG-01 in piastrine usando la trombopoietina(TPO)100ng.
Per regolarmi sulla tempistica del differenziamento ho usato questi articoli scientifici:

·         24h – pseudopodia (Yang et al., 2016) with 80 ng TPO

·         48h – platelet-like particles (Risitano et al., 2012)  with 100ng TPO

Io ho usato un "6 wells plate" con 3mL di medium per well ed una densita' cellulare di 0.3 x 106. Inoltre ho aggiunto 100ng di trombopoietina(TPO).
Dopodiche' ho controllato le cellule ogni 6-12 ore al microscopio.
Questi sono i miei risultati:

1.Dopo 24h non sono comparsi pseudopodi.
2.Dopo 48h non sono comparse "proto-platelets"
3.Gli "Pseudopodia" sono comparsi solo in alcuni megacariociti dopo 60h di incubazione in TPO.

Le mie domande:

1- Quanto ci mettone le MEG-01 cells a differenziarsi in piastrine usando 100ng di TPO? Dovrei usare una concentrazione maggiore?

2- Durante l'incubazione dovrei aggiungere TPO ogni giorno e soltanto quando cambio il medium alle cellule?

3- Ho allegato due foto delle mie cellule dopo 60h di incubazione con 100ng TPO. Vorrei chiederVi se qualcuno mi puo ocnfermare che questi "ragnetti" che si vedono sono megacariociti con gli pseudopodi.

Qualsiasi tipo di aiuto sara' estremamente apprezzato.



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