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flavy87
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 27 gennaio 2009 : 13:23:49

ciao rgazzi

sono una student di med veterinaria e vorrei ke qualquno mi spigasse in modo semplice (IL PI� SEMPLICE POSSIBILE) cos � la PCR? e cos � una SONDA MOLECOLARE ?

vi prego aiutatemi grazie fl�

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 27 gennaio 2009 : 14:22:34

Per la PCR vedi:

http://www.molecularlab.it/principi/tecniche/pcr-polimerizzazione-catena.asp
http://it.wikipedia.org/wiki/Reazione_a_catena_della_polimerasi

Le sonde sono semplicemente piccoli tratti di DNA complementari ad una zona di interesse. Se marchi in qualche modo questa sonda (es. usando nucleotidi radioattivi o rendendola fluorescente) puoi metterla insieme (ibridarla) al tuo campione e vedere se la sequenza di interesse � presente.
E' il concetto alla base di tecniche come il Northern blot, il Southern blot e l'ibridazione in situ

Vedi anche questa simpatica animazione
http://www.molecularlab.it/interactive/tecniche/probe.asp

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FRANCESCA DE ANGELIS
Nuovo Arrivato

Citt�: BARI

26 Messaggi

Inserito il - 27 gennaio 2009 : 15:21:42

la PCR (reazione a catena della polimerasi) � una tecnica che permette di amplificare un tratto di DNA migliaia di volte. per amplificare la sequenza di interesse sono necessari due primers ovvero due corte sequenze nucleotidiche rappresentanti le regioni iniziale e finale del tratto in esame. Viene utilizzata una particolare DNA-polimerasi che resiste alle alte temperature (taq polimerasi)che riconosce i primers e replica il tratto di DNA compreso tra essi. Ogni ciclo di PCR consiste di 3 fasi:
- fase di denaturazione nella quale si ha distacco delle due eliche di DNA
- fase di annealing nella quale si ha legame dei primers a livello delle sequenze complementari sul DNA (inizio e fine della sequenza da amplificare)
- fase di allungamento nella quale si ha la replicazione della regione compresa tra i due primers
Ad ogni ciclo la sequenza viene amplificata in modo esponenziale (2-4-8,ecc)fino ad ottenere migliaia di copie