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MARYANGY
Nuovo Arrivato
85 Messaggi |
 Inserito il - 08 marzo 2009 : 11:24:21
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quali sono i tests x la proliferazione e la citotossicità cellulare? ad esempio: TEST CFDA, TEST DELLA TIMIDINA TRIZIATA, ed MTT TEST sono test x la proliferazione o x la citotossicità? in particolare quello della timidina triziata cm funziona? perchè gli altri due piu o meno li ho capiti... aspetto vostre notizie grazie!
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 08 marzo 2009 : 12:23:16
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La timidina triziata viene usata per valutare la proliferazione cellulare. In pratica le cellule durante la fase di crescita replicano il DNA e quindi la timidina triziata viene inserita al posto della normale timidina nei neo-filamenti. logicamente, maggiore sarà la crescita e maggiore T triziata verrà incorporata. A quel punto puoi disegnare una curva di crescita andando a valutare la radioattività emessa.
Se poi, per esempio, vuoi valutare gli effetti di una sostanza X sulla crescita cellulare, confronti la curva di crescita delle cellule trattate con X vs curva di una popolazione cellulare non trattata.
L'MTT test è un saggio di citotossicità, il CFDA invece non lo conosco.
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...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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MARYANGY
Nuovo Arrivato
85 Messaggi |
Inserito il - 08 marzo 2009 : 15:53:37
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ok vediamo se ho capito: essendo la timidina triziata inglobata dalla cellula quando questa si duplichera dimezzerà il suo contenuto di T triziata giusto? oppure è il contrario? cioè la cellula duplicandosi aumenta il suo contenuto di T triziata? e poi un altra domanda: x vedere se cè stata proliferazione si dosa la radioattività? grazie x la risposta di prima ! |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 08 marzo 2009 : 17:39:18
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normalmente una cellula in coltura non "dispone" di timidina triziata, a meno che non gliela fornisca tu. quindi, più si replica e più timidina triziata (presa dall'esterno!) verrà incorporata nei filamenti di DNA neosintetizzati per le cellule figlie.
per l'altra domanda mi sembra di averti già risposto:
Citazione:
Messaggio inserito da Iside
A quel punto puoi disegnare una curva di crescita andando a valutare la radioattività emessa.
prova a darci un'altra occhiata.
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MARYANGY
Nuovo Arrivato
85 Messaggi |
Inserito il - 10 marzo 2009 : 12:47:25
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| ehi iside sei stata molto chiara! grazie di tutto... cm farei senza di voi! |
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Rosa Curci
Nuovo Arrivato
18 Messaggi |
Inserito il - 10 marzo 2009 : 13:15:36
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| io utilizo l' MTS, se vuoi ti mando il protocollo |
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MARYANGY
Nuovo Arrivato
85 Messaggi |
Inserito il - 10 marzo 2009 : 18:58:45
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| no rosa nn ce ne bisogno perchè devo fare solo un piccolo esamuccio! grazie cmq! |
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 11 marzo 2009 : 23:22:03
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| cmq l'MTT e' un saggio di proliferazione, che inderattamente puo' essere usato per misurare la citotossicita'. |
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DNAfingerprinting
Nuovo Arrivato
Prov.: Pordenone
Città: Fiume Veneto
23 Messaggi |
Inserito il - 24 marzo 2010 : 15:57:09
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Ciao Ragazzi! Qulcuno per favore potrebbe spiegarmi come funziona il saggio MTS?
Grazie |
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mattia.dinunzio
Nuovo Arrivato
116 Messaggi |
Inserito il - 25 marzo 2010 : 09:06:44
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Sinceramente io ho dei grossi dubbi nel considerare il saggio del MTT come di proliferazione. Infatti nel mio caso pur avendo delle significative differenze nel formazano prodotto, il contenuto di proteine non cambia. Io lo considererei piu di vitalità o meglio di attività mitocondriale. Inoltre poiche MTT viene trasformato da un enzima di membrana tutte le molecole che ne possono modificare la permeabilità e la rigidità (PUFA e colesterolo???) potrebbero di conseguenza modificare l'attività dell'enzima senza necessariamente indurre una variazione della vitalità.
E adesso sotto con le critiche!! |
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cami
Utente Junior
Città: roma
136 Messaggi |
Inserito il - 25 marzo 2010 : 14:39:02
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Citazione:
Messaggio inserito da mattia.dinunzio
E adesso sotto con le critiche!!
hihihi.... 
no, nessuna critica, in realtà quello che dici è giusto, e in effetti l'MTT sarebbe un saggio per valutare la citotossicità, però è anche vero che spesso viene usato come saggio di proliferazione (io per esempio lo uso in questo senso), perchè si presume che maggiore è la quantità di formazano prodotto, maggiore è il numero di cellule presenti nel pozzetto (ovviamente però si deve trattare di cellule vive, e in grado di effetturae la reazione, quindi "attive"). personalmente, io lo uso come test di proliferazione, però è anche vero che prima di fare l'MTT io faccio sempre almeno un paio di curve di proliferazione dose-risposta, in modo da verificare se il trattamento che faccio alle cellule ne arresta la proliferazione senza provocare tossicità. il problema di questo saggio è che se si vede meno formazano nei pozzetti dove le cellule vengono trattate, si può solo affermare che c'è una minore quantità di cellule in grado di effettuare la reazione di conversiona, ma è difficile dire se questo sia dovuto ad un arresto della proliferazione, a tossicità indotta dal trattamento o addirittura da un'inibizione degli enzimi mitocondriali che effettuano la reazione... per questo non è uno dei miei saggi preferiti, ma comunque resta un mio pippone mentale, e per rispondere alla domanda iniziale di MARYANGY, l'MTT è un saggio per la citotossicità, come ti ha già detti Iside..
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Discussione |
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proliferazione cellulare
Didattica e Relazioni
