Ciao a tutti!!! Mi sapreste indicare la % max di SDS che si può usare in first dimensione? mi risulterebbe 0,25%!! Dove posso trovare prove di questo dato??References ecc....
Ciao Pista, non vorrei sbagliarmi ma l'SDS come agente denaturante per la prima dimensione è sconsigliato. Generalmente l'SDS nei protocolli più recenti è infatti sostituito dal DTT a concentrazioni che vanno da 10 a 100mM. Io uso il DTT a 65mM e lo aggiungo all'ultimo momento nel rehidratation buffer. Ciao Ciao Lu
Secondo il protocollo della blue-native descritto nell'articolo di nijtmans et al (methods 2002 volume 26 pgg 327-334), nella prima dimensione non si usa l'sds in quanto è un agente denaturante.Io di solito utilizzo nella prima dimensione un gradiente 5%-13% che risolve un ampio range di pesi molecolari(100-1000Kda).Se hai bisogno di ulteriori dettagli fammi sapere che ti aiuto volentieri.