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giovis
Nuovo Arrivato

Prov.: SA
Città: Salerno


14 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2012 : 14:38:42  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di giovis Invia a giovis un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti,
ho una domanda da porre: cromatografia ed elettroforesi sono tecniche separative, entrambe possono essere utilizzate per proteine, acidi nucleici, zuccheri e altre molecole. Ma in un laboratorio in base a cosa si sceglie se usare la cromatografia o l elettroforesi per un determinato campione? Quali sono i pro e i contro di entrambe le tecniche che permettono di scegliere quella più efficiente?
Grazie :)

0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2012 : 14:43:29  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Per dire qualcosa che i libri di testo si dimenticano di dire, in sostanza si sceglie in base a quello che in lab la gente conosce e sa fare...
Tant'è vero che spesso si predilige la classica SDS-PAGE, economica e di facile esecuzione.

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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giovis
Nuovo Arrivato

Prov.: SA
Città: Salerno


14 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2012 : 14:46:52  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di giovis Invia a giovis un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Quindi sostanzialmente non c'è una tecnica che funziona meglio nella separazione della molecola X in senso generale, dipende da ciò che si dispone in laboratorio e da quale si è più bravi a fare?
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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2012 : 14:59:15  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Dipende da questo, poi ovviamente ci sono altri razionali.
Per fare un esempio...
In un laboratorio che ha molta pratica con la spettrometria di massa (MS), ho notato che si predilige l'applicazione di tecniche cromatografiche per separare tra loro gli analiti presenti nel campione ed iniettarli direttamente nello spettrometro. Questa strategia è sicuramente più agevole che la combinazione elettroforesi 2D + MS, in cui di fatto l'operatore, o un braccio robotizzato per lui, deve fisicamente prelevare gli spot di interesse dal gel e prepararli poi per l'analisi spettrometrica.

Poi dipende cosa vuoi separare da cosa: le elettroforesi presentano la limitazione di separare tra loro i campioni solamente in base al peso molecolare (o all'ingombro idrodinamico, a seconda del tipo) e/o del pI. Una cromatografia invece presenta un notevole ventaglio di possibilità: oltre che per le dimensioni e pI, gli analiti possono venir separati per all'idrofobicità o per capacità di interagire con un'altra molecola(cromatografia per affinità).

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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giovis
Nuovo Arrivato

Prov.: SA
Città: Salerno


14 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2012 : 17:43:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di giovis Invia a giovis un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie mille per le informazioni :) sei stato utilissimo
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