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supererry
Nuovo Arrivato

Prov.: Torino
Città: Torino

82 Messaggi

Inserito il - 17 agosto 2012 : 20:54:51

Buongiorno a tutti, ho appena estratto le proteine da tessuto, e ho calcolato la loro concentrazione ug/ul:
a: 3,07
b: 1,60
c: 1,66
d: 1,36

Ora devo diluire i campioni in laemmly? di quanto?
non so quanto devo caricare su gel. potete aiutarmi?

Martin.diagnostica
Utente Attivo

1582 Messaggi

Inserito il - 18 agosto 2012 : 02:10:50

che intendi per gel di proteine? SDS-PAGE o western blot? come mai il campione a è il doppio degli altri? diciamo che vuoi caricare 15 ug nel minimo volume possibile (se no sai fare questi conti immagino che non avrai maturato ancora una buona manualità) eccoti lo schema

https://docs.google.com/spreadsheet/ccc?key=0Aj8N2YUdSdxCdE0ySWVfSkh6TF9sZkh5WnBjNTliOWc

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GFPina
Moderatore

Città: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 18 agosto 2012 : 09:50:41

Comunque si chiama laemmli! (http://en.wikipedia.org/wiki/Ulrich_K._Laemmli)

In ogni caso dipende da che gel devi fare, da quanto è espressa la tua proteina, dalla capienza dei pozzetti... 15ug come suggeriva Mmartin possono andare bene.

supererry
Nuovo Arrivato

Prov.: Torino
Città: Torino

82 Messaggi

Inserito il - 24 agosto 2012 : 23:58:32

si, e' un sds page per poi fare un western.