disegnare primer

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Genetica del comportamento
Autori Vari

Dove ci porta la scienza
Alberto Oliverio

Il gene VI
Benjamin Lewin

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

MolecularLab

Biotecnologie

disegnare primer

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Biotecnologie:

Siti Scientifici

Protocolli Laboratorio

Glossario

Didattica e Principi

Multimedia

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto � utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

ell8830
Nuovo Arrivato

9 Messaggi

Inserito il - 28 ottobre 2013 : 16:51:53

salve io avrei questo esercizio:
Disegnare un primer per inserire l 'enzima piruvato deidrogenasi nel vettore pUC19.
qualcuno mi consiglia come farlo?
grazie

vdolce
Nuovo Arrivato

4 Messaggi

Inserito il - 10 novembre 2013 : 10:05:53

scusa ma questo � un esercizio teorico?
non � molto facile da spiegare a chi lo deve fare veramente e non sa da dove iniziare
cmq ci provo
trova la sequenza nucleotidica della piruvato DH (nelle banche dati)
controlla che nella sequenza che vuoi clonare non ci siano gli enzimi di restrizione che vuoi usare nel clonaggio (e che devono essere invece presenti nel polilinker del plasmide)
scrivi due primer forward e reverse (scritti al 5' e al 3' della sequenza che vuoi clonare) dopo che li hai scritti al 5' dei due primer aggiungi i siti di restrizione che ti servono nel clonaggio
fai la PCR con questi primer su cDNA
digerisci il frammento che hai avuto e il vettore con gli enzimi di restrizione scelti
sottoponi il tutto a ligazione
e il gioco � fatto