ciao a tutti! avrei bisogno di una mano...sto leggendo un articolo che confronta le proteine del tripanosoma cruzi sottoposto a heat shock con il controllo a T normale con lo scopo di studiare proteine che non sono heat shock per scoprire come sopravvive il parassita quando si muove da un ospite vertebrato ad un ospite invertebrato in modo da trovare un potenziale agente terapeutico. La tecnologia usata è elettroforesi bidimesionale e poi le proteine differenzialmente espresse sono analizzate con MALDI-TOf. vorrei sapere secondo voi, quale potrebbe essere un metodo alternativo, per ottenere lo stesso risultato. avevo pensato ad una DIGE GRAZIE
Quindi magari fare microarray per confrontare gli stati cellulari e poi però gli spot andrebbero trattati con tripsina e analizzati con spettrometria? giusto? Volevo farti un'altra domanda: conosco il MASCOT come programma per vedere la probabilità che la proteina contenuta nella banca dati è più simile alla mia(quella sperimentale) e so che fa uso di un algoritmo. Nel mio articolo riporta il valore del MOWSE score la differenza è che questo è l'algoritmo del MASCOT? cioè avendo già il MOWSE Score io non devo applicare l'algoritmo punteggio valutato dal software=- log(P) perché me lo ha già calcolato lui? o lo devo applicare in modo da calcolarmi la probabilità che il match tra la proteina sperimentale e quella nel database non sia casuale?? GRAZIE
posso fare un'altra domanda a cui personalmente con il mio studio non so rispondere? mi viene chiesto di mettere in ordine crescente di potere di risoluzione queste strumentazioni spettrometriche • Orbitrap • Maldi-ToF a riflessione • Sistemi quadrupolari
direi i sistemi quadrupolari per ultimi poi maldi -tof poi orbitrap che dite?
Ritornando al discorso principale...stavo riflettendo e non capisco perché non applicare la DIGE? alla fine nell'articolo fa una differenza tra la condizione normale e la condizione sperimentale quindi fa proteomica differenziale...perché quindi la DIGE non andrebbe bene? ho l'esame venerdì e l'articolo lo devo presentare...mi aiutate?
posso fare un'altra domanda a cui personalmente con il mio studio non so rispondere? mi viene chiesto di mettere in ordine crescente di potere di risoluzione queste strumentazioni spettrometriche • Orbitrap • Maldi-ToF a riflessione • Sistemi quadrupolari
direi i sistemi quadrupolari per ultimi poi maldi -tof poi orbitrap che dite?
Concordo
E si, puoi usare anche una DIGE.
Per i microarray mi riferivo a studi di espressione genica a lavello trascrittomico (mRNA per intenderci)
Per il resto vado un po' di fretta
So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today. A Universe From Nothing, Lawrence Krauss