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andreaB81
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 07 maggio 2014 : 10:56:57

Buon giorno a tutti,avrei bisogno di un consiglio o suggerimento.
Ho scongelato lunedi delle mefs del 2002, e ho provato a ripropagarle su terreno completo (DMEM /FBS 10% 1x finale glutammina 1x finale pen-strep). Al secondo giorno l'80% � morto, come prevedevo. Comunque sia ho cambiato terreno (per eliminare residuo di DMSO. Oggi sono andato a controllare e molte sono rimaste circolari (non hanno fibroblastizzato, alcune hanno iniziato, comunque sia sono poche le cellule che si sono attaccate sulla piastra. Secondo la vostra personale esperienza, ce la far� a rivitalizzarle o anche queste poche entro massimo 2 gg saranno morte? Nel caso possa riattivarle, avete suggerimenti?
Grazie mille

Citosina
Nuovo Arrivato

Citt�: Milano

73 Messaggi

Inserito il - 09 maggio 2014 : 18:41:55

Mi � capitata una cosa del genere con dei MEF primari molto vecchi. Hanno impiegato parecchio tempo a riprendersi (almeno una settimana cambiando il terreno a giorni alterni ad es: cambio il luned�, il mercoled� e il venerd�). In genere con aliquote cos� vecchie preferisco piastrare in petri piccole (generalmente in una petri da 60cm).