Quantificazione proteine problemi

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mauro-23
Nuovo Arrivato

4 Messaggi

Inserito il - 06 luglio 2014 : 12:49:34

Salve a tutti spero possiate darmi una mano!
Ho un grosso problema in laboratorio ho necessit� di quantificare proteine da lisato cellulare. Il buffer di lisi che utilizzo � composto da Tris-HCl 50mM pH 7.5, NaCl 150mM, IP 1%, NP40 1%.
Quando vado a quantificare le proteine (ho provato sia un Bradford che un Lowry)non riesco. Ho pensato fosse un problema di detergente ho cambiato NP40 con Triton ma non ho risolto il problema, ho anche modificato il buffer di lisi sostituendo il Tris con HEPES ma ugualmente niente. Oltretutto tutte le concentrazioni delle componenti del buffer sono compatibili con i saggi che ho utilizzato.
Avete mai avuto problemi del gene? Aspetto vostri consigli

l�
Utente Junior

565 Messaggi

Inserito il - 09 luglio 2014 : 18:10:47

Ciao! io uso questo buffer di lisi e riesco a quantificare senza problemi:

Tris HCl ph 7.6 20mM
EDTA ph 8 10mM
NaCl 280mM
NP-40 1%
inibitore delle proteasi