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Autore Discussione  

chiarix
Nuovo Arrivato

Prov.: Latina
Città: aprilia


4 Messaggi

Inserito il - 05 settembre 2007 : 16:40:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chiarix Invia a chiarix un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
A che scopo si utilizza la coltura cellulare su agar?
Grazie

chiarix

biomol
Nuovo Arrivato



65 Messaggi

Inserito il - 05 settembre 2007 : 18:34:58  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biomol Invia a biomol un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
immagino tu stia parlando di cellule eucariotiote.in questo caso la crescita su agar serve anzitutto a discriminare cellule sne da cellule tumorali ed inoltre in funzione del numero di clone che si formano sulla piastra puoi anche individuare il grado di malignità delle cellule cancerose.
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zio
Utente Junior


Città: Napoli (IRAQ)


120 Messaggi

Inserito il - 05 settembre 2007 : 19:43:30  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di zio Invia a zio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ben trovati a tutti
un uso della combinazione cellule-agar può essere questa:

DETERMINAZIONE QUANTITATIVA DEI VIRUS (TITOLAZIONE VIRALE) METODO DELLE PLACCHE
Imetodo sensibile, accurato, altamente riproducibile
utilizzabile sia per virus animali che per batteriofagi
permette la conta delle sole particelle infettanti (non rileva virus inattivi)
PROCEDIMENTO
-Si utilizza un monostrato di cellule (eucariotiche o batteriche) aderenti a un supporto solido (es: piastre Petri)
-Si diluisce serialmente (10-1,10-2,10-3 etc.) il virus da titolare e lo si inocula su piastre diverse
-Dopo l'assorbimento del virus alle cellule si elimina l'inoculo e lo si sostituisce con terreno contenente sostanze gelatinose (agar molle o metilcellulosa) o anticorpi neutralizzanti il virus . Questo procedimento serve ad immobilizzare o inattivare chimicamente i virioni che fuoriescono dalle cellule infette (progenie virale) impedendo loro di reinfettare altre cellule e produrre foci di infezione secondaria.
I virioni della progenie possono quindi infettare solo cellule adiacenti (diffusione cellula-cellula) dando origine ad aree litiche (placche di lisi) o lesioni evidenziabili in vari modi:
-osservazione dell'effetto citopatico (colorazione con un colorante vitale)
-emoadsobimento
-immunofluorescenza
Il titolo virale si ricava direttamente dalla conta delle placche X il fattore di diluizione e si misura in PFU/ml
Il numero delle placche è proporzionale alla quantità di virus inoculato, quindi la curva dose-risposta è lineare.
Questo significa che una singola placca può originare da un singolo virione =Plaque Forming Unit= pfu e che ogni singola placca contiene un clone di particelle virali .

-virologia applicata-

zio
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Giuliano652
Moderatore

profilo

Prov.: Brescia


6941 Messaggi

Inserito il - 05 settembre 2007 : 19:46:52  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
beh, quella non è crescita su agar, lì l'agar glielo schiaffi sopra dopo l'infezione

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zio
Utente Junior


Città: Napoli (IRAQ)


120 Messaggi

Inserito il - 05 settembre 2007 : 21:14:18  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di zio Invia a zio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Giuliano652

beh, quella non è crescita su agar, lì l'agar glielo schiaffi sopra dopo l'infezione


grazie della precisazione, hai ovviamente ragione, infatti ho risposto così:
"un uso della combinazione cellule-agar può essere questa:....."
proprio xkè la domanda non è tanto ovvia come confermato da biomol.cmq a mio parere a volte fa bene (a noi non-scienziati) rinfrescare degli argomenti anche se correlati ad una risposta non centrata in pieno
e...forza Napoli

zio
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chiarix
Nuovo Arrivato

Prov.: Latina
Città: aprilia


4 Messaggi

Inserito il - 06 settembre 2007 : 10:32:39  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chiarix Invia a chiarix un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
scusate non non sono stata per niente chiara !!!volevo dire a che scopo si utilizzano le colture cellulari su agar per quanto riguardo le cellule eucariotiche tumorali!!
Grazie

chiarix
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biomol
Nuovo Arrivato



65 Messaggi

Inserito il - 06 settembre 2007 : 21:36:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biomol Invia a biomol un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
scusa ma te l'ho scritto.ti permette di discriminare cellule sane da malate e poi in funzione del numero dei cloni è possibile anche individuare la malignità delle cellule tumorali,più cloni più malignità.
ciao
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chiarix
Nuovo Arrivato

Prov.: Latina
Città: aprilia


4 Messaggi

Inserito il - 07 settembre 2007 : 12:42:30  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chiarix Invia a chiarix un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie !!!

chiarix
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