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carmenzita85
Nuovo Arrivato

Prov.: Napoli

15 Messaggi

Inserito il - 23 settembre 2007 : 12:31:43

Salve a tutti!
Qualcuno mi potrebbe essere di aiuto in questo problema?
Per selezionare un retromutante leu+ da un auxotrofo per la leucina(leu-) di E. coli che tipo di terreno posso usare?

PS. le scelte sono: minimo, minimo con leucina, complesso, complesso con leucina. Forse la domanda nn � formulata nel migliore dei modi xk� nn me la ricordo perfettamente, ma x favore datemi una mano.

memole
Utente Junior

Prov.: Brindisi
Citt�: brindisi

577 Messaggi

Inserito il - 23 settembre 2007 : 14:31:54

Devi utilizzare un terreno minimo per poter selezionare il tuo mutante. Il motivo � semplice: il tuo ceppo � auxotrofo per la sola leucina e in assenza di essa non pu� crescere. Nonostante questo � prototrofo per tutti gli altri aminoacidi e per le vitamine. Pertanto per selezionare il retromutante di interesse ti basta piastrare le cellule su terreno minimo: se otterrai crescita vuol dire che sarai in presenza di colonie prototrofe per tutti gli elementi e quindi anche per la leucina.

carmenzita85
Nuovo Arrivato

Prov.: Napoli

15 Messaggi

Inserito il - 23 settembre 2007 : 15:37:26

Grazie mille, la tua risposta � stata molto chiara ed esauriente

moonycinzia
Utente Junior

234 Messaggi

Inserito il - 02 ottobre 2007 : 00:50:22

Citazione:
Messaggio inserito da carmenzita85

Grazie mille, la tua risposta � stata molto chiara ed esauriente

Secondo voi non andrebbe bene anche un terreno leu-?
E' un po' come quando si utilzza un marcatore per selzionare i trasformanti, oltre alla resistenza per gli atibiotici si pu� usrae un terreno mancante di un aa sul quale cresceranno solo i trasformanti auxotrofi per lo stesso.

moonycinzia
Utente Junior

234 Messaggi

Inserito il - 02 ottobre 2007 : 00:52:51

Citazione:
Secondo voi non andrebbe bene anche un terreno leu-?
E' un po' come quando si utilzza un marcatore per selzionare i trasformanti, oltre alla resistenza per gli atibiotici si pu� usrae un terreno mancante di un aa sul quale cresceranno solo i trasformanti auxotrofi per lo stesso.

Dimenticavo...in questo modo si � certi che la mutazione riguardi solo la capacit� di sintetizzare leu e che il ceppo non abbia acquisito altre resistenze in tal senso