SALVE QUALCUNO PUO SPIEGARMI IN CHE COSA CONSISTE IL TRIPARENTAL MATING, NOI LO ABBIAMO STUDIATO NEL CONTESTO DELLA TRASFORMAZIONE DELLE PIANTE MEDIANTE A. TUMEFACIENS.MA NN HO CAPITO COME AVVIENE IL PROCESSO GRAZIE A TUTTI
Nel caso della trasformazione di piante tu devi "prepararti" un Agrobacterium tumefaciens che contenga il tuo inserto d'interesse. Per poter inserire in Agro questo frammento tu puoi utilizzare la tecnica del triparental mating ovvero il trasferimento del tuo frammento d'interesse da un microrganismo donatore ad uno accettore assistito da un helper. Nella pratica una volta che hai ottenuto il batterio con il tuo frammento d'interesse, lo misceli con gli altri due su filtri di nitrocellulosa e dopo l'incubazione li piastri. Ti consiglio di piastrare sempre: - solo donatore - solo ricevente - donatore+helper+ricevente.
Magnifico atque victoriosissimo Domino, Domino Kani Grandi de la Scala.
Triparental mating is a form of Bacterial conjugation where a conjugative plasmid present in one bacterial strain assists the transfer of a mobilizable plasmid present in a second bacterial strain into a third bacterial strain (nel tuo caso cellule vegetali). Plasmids are introduced into bacteria for such purposes as transformation, cloning, or transposon mutagenesis. Triparental matings can help overcome some of the barriers to efficient plasmid mobilization. For instance, if the conjugative plasmid and the mobilizable plasmid are members of the same incompatibility group they do not need to stably coexist in the second bacterial strain for the mobilizable plasmid to be transferred.