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zio
Utente Junior
Città: Napoli (IRAQ)
120 Messaggi |
 Inserito il - 26 giugno 2007 : 10:46:44
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  conoscete un metodo semplice, per concentrare gli anticorpi presenti a basso titolo in un emosiero?
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zio |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
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zio
Utente Junior
Città: Napoli (IRAQ)
120 Messaggi |
Inserito il - 26 giugno 2007 : 13:31:30
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 mi spiego :
in un test ELISA per la ricerca di anticorpi nei confronti del virus dell'anemia infettiva degli equidi, un campione di siero è risultato dubbio DO 0.44 e uno a limite della negatività DO 0.14 (DO pos=>0.5, DO neg=<0.15).
Ora, siccome bisogna confermare con la prova di immunodiffusione in gel di agar (AGID)e con essa sono negativi, io volevo provare ad aumentare la sensibilità della prova concentrando in qualche modo il siero di partenza.
Non possedendo le anti-IgG, avevo pensato semplicemente di far evaporare in termostato, il siero di partenza ,ma non credo che risolverei 
cos'altro potrei fare???? |
zio |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 26 giugno 2007 : 17:31:27
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Dialisi!!!
Però purtroppo al momento non sono in laboratorio e non riesco a darti tutte le informazioni.
Esistono dei "sacchettini" in cui metti il tuo siero e poi lo immergi in una soluzione molto concentrata in modo che richiami acqua, così il siero si concentra. Nel mio laboratorio lo usano per i sieri... però non mi ricordo esattamente il procedimento e come ti ho detto al momento non posso controllare i reagenti, ma appena riesco ti faccio sapere.
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zio
Utente Junior
Città: Napoli (IRAQ)
120 Messaggi |
Inserito il - 26 giugno 2007 : 22:28:56
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Citazione:
Dialisi!!!
 GFPina^_^  aspetto notizie |
zio |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 27 giugno 2007 : 20:02:37
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Prometto domani controllo!!!
Scusa  ma non l'ho fatto direttamente, devo chiedere alle mie colleghe ma in questi giorni non ero in labo!
Domani appena posso ti scrivo tutto!
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zio
Utente Junior
Città: Napoli (IRAQ)
120 Messaggi |
 Inserito il - 27 giugno 2007 : 20:06:55
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| GFPina^_^ |
zio |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 28 giugno 2007 : 17:35:09
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Ahhhhhh!!!!
Avevo quasi finito di risponderti e si è riavviato il pc!!!!
Va beh ricomincio!!!
Allora ti posso dire 2 metodi:
- 1. è quello che ti dicevo
Noi abbiamo delle specie di sacchettini che si chiamano Spectra/Por molecularporous membrane tubing, ce ne sono di vari tipi a secondo del cutoff e del diametro.
Non ho una metodica precisa ma quello che mi hanno detto è questo:
tagli un pezzetto adeguato di questo sacchettino (in realtà è un rotolo, tagliandolo hai un tubicino) ci metti dentro la soluzione che vuoi concentrare e lo chiudi molto bene annodandolo ai lati. Poi lo metti in una vaschetta con una soluzione di PEG oppure metti direttamente un po' di PEG sopra il sacchettino (metodo più veloce). Il PEG attrae l'acqua fuori dal sacchettino e il campione si concentra. Devi però fare molta attenzione e monitorarlo in continuazione per evitare che diminuisca troppo il volume e si secchi. Noi abbiamo PEG 35000 e PEG 6000 (quello più concentrato ovviamente agisce più in fretta). Devi stare attento al cutoff del "sacchettino" che scegli in base a quello che vuoi concentrare, in modo da non perderlo. Non so dirti molto di più... non ho mai provato personalmente!!!
Comunque qua trovi i link:
Spectra/Por: poi vai in Lab Dyalisis Index
Prodotti Gianni: rivenditore italiano
- 2. il secondo metodo è utilizzando delle provettine GeBAflex-tube, qua trovi i dettagli.
GeBA
praticamente sono delle provette che hanno due finestrelle ai lati, metti il campione e lasci semplicemente evaporare, dalla membrana dovrebbe uscire l'acqua ma non proteine e neanche i sali! A quanto dicono nelle istruzioni. Io le ho ma non ho mai provato questa applicazione (servono anche per altre cose ad es. estarazione di DNA o preoteine da gel). Anche queste hanno diversi cut-off (ma a quanto pare per la concentrazione non importa) e cisono di vari formati a secondo del volume.
Il rivenditore italiano (o almeno il mio "spacciatore") è Histoline. Puoi provare a sentire se te le fanno provare, a me hanno fatto provare un sacco di cose!!!
Se fossi a Milano te ne darei un paio.
Qua trovi alcune info: Histo-line GeBAflex-tubes
Finito.... invio prima che si riavvi di nuovo tutto!!!
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zio
Utente Junior
Città: Napoli (IRAQ)
120 Messaggi |
Inserito il - 28 giugno 2007 : 22:35:45
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uwè...così mi fai abbituare troppobbene  
da domani mi metto in moto con le preziosissime info che mi hai dato,
xò da sabato vado in vacanza  per una settimana, se ne riparlerà al ritorno.
cmq vada "tu si na cosa grande..."  |
zio |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 29 giugno 2007 : 00:25:13
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Figurati, di niente compà!!!
Citazione:
Messaggio inserito da zio
xò da sabato vado in vacanza per una settimana, se ne riparlerà al ritorno.
Che bello!!! Beato te! Ci vorrebbe anche a me... staccare qualche giorno fa bene anche per risolvere i problemi in labo... a mente fresca si lavora meglio!!   |
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Silvia2007
Nuovo Arrivato
Prov.: Viterbo
Città: viterbo
5 Messaggi |
Inserito il - 11 gennaio 2008 : 10:40:35
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le tue isposte mi sono state utilissime.. ciao
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silvia |
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concentrazione anticorpi nel siero
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