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Autore

Discussione

Luis 22
Utente

Citt�: Bari

755 Messaggi

Inserito il - 05 gennaio 2006 : 23:25:55

C'� una cosa che non mi � chiara in questa tecnica, poich� ho trovato informazioni discordanti.
La topoisomerasi a quale estremit� del vettore � legata? Al 3' o al 5'?

Da una parte ho letto che l'enzima si lega al 3' di una timina spaiata (in accordo giustamente con il T/A cloning) e naturalmente il prodotto di PCR da clonare porta una adenina spaiata al 3'.

Ma da un'altra parte ho trovato che la topo si lega al 5'-P mediante un suo residuo di tirosina formando un legame fosfodiestereo (in accordo giustamente sulla normale attivit� dell'enzima in vivo).

Si tratta di due situazioni differenti?
Ci vorrebbe un'immagine per capire meglio come � legata e la reazione che avviene.

La vita e i sogni sono fogli di uno stesso libro. Leggerli in ordine � vivere, sfogliarli a caso � sognare. (Arthur Schopenhauer)&

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 06 gennaio 2006 : 14:32:40

Qui trovi una spiegazione dettagliata.
Questo dovrebbe essere piu o meno lo stesso.

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