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Luis 22
Utente
Città: Bari
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 Inserito il - 05 gennaio 2006 : 23:25:55
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C'è una cosa che non mi è chiara in questa tecnica, poichè ho trovato informazioni discordanti.
La topoisomerasi a quale estremità del vettore è legata? Al 3' o al 5'?
Da una parte ho letto che l'enzima si lega al 3' di una timina spaiata (in accordo giustamente con il T/A cloning) e naturalmente il prodotto di PCR da clonare porta una adenina spaiata al 3'.
Ma da un'altra parte ho trovato che la topo si lega al 5'-P mediante un suo residuo di tirosina formando un legame fosfodiestereo (in accordo giustamente sulla normale attività dell'enzima in vivo).
Si tratta di due situazioni differenti?
Ci vorrebbe un'immagine per capire meglio come è legata e la reazione che avviene.
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La vita e i sogni sono fogli di uno stesso libro. Leggerli in ordine è vivere, sfogliarli a caso è sognare. (Arthur Schopenhauer)& |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
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Luis 22
Utente
Città: Bari
755 Messaggi |
Inserito il - 06 gennaio 2006 : 22:55:31
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| Grazie! |
La vita e i sogni sono fogli di uno stesso libro. Leggerli in ordine è vivere, sfogliarli a caso è sognare. (Arthur Schopenhauer)& |
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TOPO-cloning
Didattica e Relazioni
Inserito il - 06 gennaio 2006 : 14:32:40
