Elettroforesi in campo pulsante

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Autore

Discussione

Meykara
Nuovo Arrivato

Prov.: Roma
Citt�: Roma

17 Messaggi

Inserito il - 10 febbraio 2008 : 20:01:50

Ciao raggazi!

Vediamo se qualcuno mi pu� aiutare: il mio dubbio � sulla elettroforesi in campo pulsante. So la tecnica, ma non so lo scoppo di questa. Qualcuno mi sa dire per a che si utilizza?

Gracie!

Se comprendere � impossibile, conoscere � necessario. (Primo Levi)

Cri
Nuovo Arrivato

Citt�: Rovigo

68 Messaggi

Inserito il - 11 febbraio 2008 : 15:53:52

L'elettroforesi su gel di agarosio non � in grado di risolvere molecole molto grosse ( > 30 Kb) cio� un frammento di DNA di 30 Kb migrer� nella stessa posizione di uno di 60 Kb. Entrambi i frammenti sono in grado di entrare nei pori del gel ed attraversali guidati dalla corrente elettrica, ma non si ottiene la loro separazione (nemmeno utilizzando gel pi� lunghi o abbassando la concentrazione dell'agarosio nel gel). PFGE modificando la direzione della corrente elettrica per alterare il cammino delle molecole di DNA risolve poco pi� di 10.000 kb.
Il DNA � forzato a cambiare direzione, dalla banda larga e diffusa iniziano a separarsi frammenti con differente dimensione. Probabilmente il cambiamento di direzione inibisce o riduce la formazione di grovigli. ad ogni orientamento del campo elettrico rispetto al gel, i frammenti di DNA pi� piccoli inizieranno a muoversi nella nuova direzione piu� velocemente di quelli pi� grossi.Quindi il DNA pi� grosso resta indietro , permettendo la sua separazione dai frammenti piccoli.