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Inserito il - 14 gennaio 2006 : 09:36:13
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Buondì,
capita che ti capita in mezzo a 3 esami devo assolutamente scavare un giorno per includere e fettinare dei cervelli (mus musculus, di 1 mese e 2 settimane rispettivamente) e dei testicoli (idem come sopra) - ora riposano in etanolo70% dopo la classica perfusione in PFA4% dei topastri. Per i testicoli non ho problemi perché in laboratorio c'è un'esperta (che fortuna, eh); mentre per il cervello sono nelle canne: da noi soltanto una ragazza gestisce fettine di cervello e le fa al criostato, in un altro laboratorio...inutile dire che è quello il pezzo più importante e che, damn, nei topastri di 1 mese ci siamo presi anche mezzo cm di midollo, che sinceramente mi inquieta ulteriormente.
Avete link simpatici da darmi? Sappiate che sono una patita dei protocolli che potrei seguire anche in caso di amnesia totale :) Nel senso: i passaggi per eliminare la PFA dovrebbero essere soltanto tediosi (ho un protocolletto) e poi anche per sparaffinare le fettine non dovrei (ahaha) aver problemi. Però il posizionamento del pezzo nella paraffina e i tips and tricks del caso mi potrebbero essere molto utili. Grazie! Scambio la figurina con protocolli a prova di idiota per tecniche di biologia molecolare plasmidante, qualche avvitamento di mano sotto cappa molto basic e, giusto in tema, quello della perfusione :)
Graz, E.
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lid
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Inserito il - 14 gennaio 2006 : 15:07:59
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guarda io sono alle primissime armi e non so praticamente nulla di tecniche di laboratorio, ma posso dirti di aver visto fare fettine di cervello in paraffina con i microtomi nei lab di veterinaria a grugliasco... non so ciò a cosa ti giovi, magari era la persona a cui ti riferivi tu, però magari conosci qualcuno che bazziga da quelle parti cui chiedere info, mi spiace ma non so dirti altro!
ciao |
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Inserito il - 14 gennaio 2006 : 15:54:50
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Ciau,
grazie per la risposta. La mia conoscenza di microtomi non è relativa a Grugliasco (conosco gente che include e fettina ad Anatomia Patologica a Torino e altri a Candiolo). Il fatto è che noi nel nostro laboratorio abbiamo il microtomo e che l'ordine maGno è di fare il tutto in casa; quindi o mi accodo a qualcuno che sa fettinare e vediamo di cavarcela con il cervello (ma al momento c'è poca gente disponibile) o mi recupero un'anima pia che mi regali un giorno (l'unico che ho sentito per ora è diventato animalista e starebbe troppo male...e viene a dirlo a me, vegetariana e laboratorista! :) ). La terza ipotesi è chiedere in giro e scavare su internet a fondo finché non decido di provare così alla cieca con il primo campione...nel frattempo torno a Patologia che prima di tutto sarebbe simpatico dare qualche esame.
E. |
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chick80
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Inserito il - 14 gennaio 2006 : 22:31:11
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Fettine fredde di cervello adulto?
Sull'atlante avevo cercato online un po' di roba trovando poco, in realtà. Io sull'anatomia murina sono a zero, figurati che prelevando i testicoli mi son chiesta se il nostro topo soffrisse di criptorchidismo...ahem. Ecco cosa succede a studiare medicina.
Grazie per il link protocollante, cercherò qualcosa. |
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chick80
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Inserito il - 14 gennaio 2006 : 23:40:08
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Beh, io uso acute brain slices, che e' una cosa un po' diversa. Il cervello non viene congelato, viene tagliato subito in fettine molto spesse (150-200 um) e poi vengono tenute ancora 'vive' in un'apposita soluzione.
PS: criptorchidismo! ahah geniale!!! |
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Inserito il - 14 gennaio 2006 : 23:45:15
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Simpatico ma ahimè prematuro per quanto riguarda i nostri topastri. Mi è venuto in mente giusto ora un articolo di cui mi han parlato in cui, studiando neuroni in coltura wirati (bleah, che parola) ed eccitandoli variabilmente, hanno dimostrato che basta questo per determinare il taglio di app via beta e poi gamma secretasi...insomma, pensare e studiare troppo fa male, anandamide a parte, quindi mi lancio verso il letto con le mie fide fotocopie di psicologia clinica al fianco. |
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