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 Cromatografia bastarda, cosa sono queste sigle....
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dany molise
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31 Messaggi

Inserito il - 17 giugno 2008 : 16:24:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di dany molise Invia a dany molise un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao giovani avrei bisogno di un pò di spiegazioni al riguardo di:

- cromatografia liquida a scambio ionico(sono gli addolcitori per le acque????)

- cromatografia IEC(potreste spiegarmi questo metodo, non riesco a capire cosa c'entrano i sali nelle due bocce)

- cromatografia per affinità, mi interessa The Flag protein expression sysstem, immobilized-metal affinity cromathgrafy, purification of his-tagged proteins)

grazieeeeeeeeeeeee
ciaooooooooooooooooooooooooooooooooooooooooo

dany molise
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31 Messaggi

Inserito il - 18 giugno 2008 : 23:06:53  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di dany molise Invia a dany molise un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
c'è qualcuno intenditore di queste cose???? per gli esperti saranno quattro cavolate, aiutatemiiii per favore....


- cromatografia a scambio ionico, non riesco a capire cosa c'entrano i sali nelle due bocce, il gradiente di pH oo salino?????

- cromatografia per affinità, mi interessa The Flag protein expression sysstem, immobilized-metal affinity cromathgrafy, purification of his-tagged proteins)

- cos'è il cromatofocusing?????

- Gel shift cosa c'entra nell'elettroforesi????


grazieeeeeeeeeeeee
ciaooooooooooooooooooooooooooooo
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Clivi
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22 Messaggi

Inserito il - 26 giugno 2008 : 16:16:18  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Clivi Invia a Clivi un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Per quello che so io la cromatografia di affinità si basa su interazioni specifiche tra soluto e ligando, es.Ag-Ac. L'interazione è reversibile e la Kd deve essere compresa tra 10^-4 e 10^-8.
E' una tecnica ad alta specificità e alta risoluzione.
Consiste in una matrice rigida costituita da gruppi chimici funzionali, da uno spacer di 6-10 atomi di carbonio che serve per l'interazione, e il ligando, il quale può essere un cofttore, un recettore, ecc.
Senza dilungarmi oltre sulla cromatografia di affinità in generale, so che l'Immobilized-metal affinity cromatography, detta anche IMAC, prevede che uno ione metallico sia immobilizzato e leghi la proteina attraverso una reazione con i gruppi imidazolici di residui cisteinici. L'eluizione prevede l'abbassamento del pH (che destabilizza il complesso proteina-metallo) oppure l'utilizzo di EDTA.
Magari ti avrò ripetuto cose che sai già, ma spero di esserti stata almeno un po' utile, perchè non sono un'esperta...
Ciao
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