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princy
Nuovo Arrivato



9 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2008 : 12:29:15  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di princy Invia a princy un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao ragazzi. Qualcuno saprebbe darmi info sulle tecniche di selezione dei microrganismi che producono antibiotici?

Flap
Utente Junior



172 Messaggi

Inserito il - 23 settembre 2008 : 16:36:46  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Flap Invia a Flap un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Credo che il metodo più antico sia lo screening. Vengono piastrati su una piastra Petri vari isolati dicolture pure di microrganismi presunti produttori di antibiotici e messi in incubazione insieme ad un microganismo indicatore. Le zone di inibizione della crescita dell'indicatore permettono di rilevare quali isolati stanno producendo antibiotici. O alcuni dei ceppi considerando che l'anitbiotico prodotto può essere a spettro ristretto e dunque non essere inibito dall'antibiotico in questione.
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mollichina di pane
Utente Junior

Miyu



121 Messaggi

Inserito il - 01 ottobre 2008 : 22:04:09  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mollichina di pane Invia a mollichina di pane un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ci sono anche altre tecniche...te ne scrivo qualcuna:
•Raccolta del surnatante, derivante da colture in liquido di microorganismi di interesse (presumibilmenyte produttori di antibiotici), attraverso centrifugazione e filtrazione. Diluizioni del surnatante. A questo punto dovresti tuilizzarli così:
•Crescita in terreno agarizzato dei microorganismi target (in questo caso ti faccio l'esempio di alcuni funghi patogeni). Preleva dischi di agar di 5mm di diametro dal micelio fungino in crescita e ponili in test tubes da 5mL di brodo contenenti diverse concentrazioni del surnatante. Dopo 3 giorni (ma dipende dai microorg!) rimuovi i dischi , sciacquali con acqua distillata sterile e ponili di nuovo in terreno agarizzato fresco in piastra. Passati tot. giorni di incubazione alla T°C appropriata, osserva la ricrescita del micelio fungino e valuta le Minime Concentrazioni Inibitorie.
•Agar diffusion assay: consiste nell’applicare spore di ciascun patogeno sulla superficie di un terreno agarizzato per creare un intero strato di crescita. Alternativamente si può prelevare un disco di agar dal micelio fungino e porlo nel centro di una piastra contenente terreno agarizzato, in modo tale che cresca e colonizzi l’intera superficie. Dalle piastre di crescita così ottenute si provvederà a rimuovere dei pozzetti circolari, del diametro di circa 7mm, nei quali saranno poste aliquote di surnatante a diverse concentrazioni. Le piastre verranno poi incubate nelle condizioni ottimali per i patogeni e dopo 3-4 giorni verrà valutato l’alone di inibizione della crescita dei patogeni attorno ai pozzetti.
Spero di essere stata chiara.
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