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Nik83
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
 Inserito il - 30 marzo 2009 : 12:27:55
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ciao a tutti
son nuovo e parto con le domande a raffica...
non riesco a degasare questa fase:
-tampone fosfato a pH non controllato (KH2PO4 6,8 g/l in H2O milliQ = NOION AQUA) per 15 minuti in degasatore a ultrasuoni.
solitamente nel mio lab se non basta il degasatore a ultrasuoni si provano queste qui:
-altri 30 minuti in degasatore a ultrasuoni (nessun risultato)
-portare a ebollizione sottovuoto (nessun risultato)
-eliminare i filtri dal pescante (nessun risultato)
-aumentare l'agirtazione della fase (nessun risultato)
-raffreddare in frigo e riportare lentamente a t.amb. (nessun risultato)
in pratica qualunque cosa si faccia, in circa 30 mnuti si riformano grosse bolle nella fase e anche se non vengono aspirate direttamente dal pescante, si formano nel tubo...
COSA SI FA A QUESTO PUNTO?
grazie a tutti!
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
 Inserito il - 30 marzo 2009 : 16:47:12
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Guarda, non so se la cosa si possa adattare al tuo sistema, ma nei sistemi di elettrofisiologia generalmente si usa una "bubble trap" fatta in questo modo:
- tagli il tubo (presupponendo che tu abbia tubi di gomma) ed attacchi l'estremità da cui arriva il liquido ad un ago
- all'altra estremità attacchi la parte finale di una siringa (quella dove andrebbe l'ago) a cui avrai tolto il pistone.
- chiudi l'estremità aperta della siringa con un tappo di gomma in modo che sia a tenuta stagna
- infili l'ago nel tappo di gomma.
In questo modo il liquido cadrà nella siringa e si accumulerà un po' sul fondo. Nel momento in cui arriva una bolla semplicemente il livello del liquido nella siringa scenderà un pochino, ma la bolla non passerà!
Sei anche fortunato perchè ho addirittura uno schemino!
Immagine:
8,59 KB
Volendo puoi infilare nel tappo un secondo ago che colleghi ad una siringa con la quale puoi alzare/abbassare il livello del liquido.
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Nik83
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
Inserito il - 31 marzo 2009 : 07:22:27
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beh si è il sistema delle flebo giusto?
però il problema è che le bolle si formano con il tempo dalla soluzione, come quando lasci una bottiglia di acqua di rubinetto tappata, per qualche ora al sole per intenderci...
IN EFFETTI POTREI ANCHE PROVARCI, tanto il sistema di pescaggio è (fino a prima della pompa) a pressione atmosferica quindi no problem...
sarà più difficile convincere i colleghi a provare una cosa nuova...
GRAZIE! |
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simcrist
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Milano
62 Messaggi |
Inserito il - 08 aprile 2009 : 09:03:30
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Ciao,
io normalmente degaso sotto servendomi di una beuta codata sottovuoto. Durante la fase di degasaggio inoltre inserisco un ancoretta magnetica allo scopo di agitare la soluzione. Ciò che osservo è che dopo 1 ora l'aria è normalmente sparita.
Hai provato ad aumentare il tempo di degasaggio?
Citazione:
Messaggio inserito da Nik83
ciao a tutti
son nuovo e parto con le domande a raffica...
non riesco a degasare questa fase:
-tampone fosfato a pH non controllato (KH2PO4 6,8 g/l in H2O milliQ = NOION AQUA) per 15 minuti in degasatore a ultrasuoni.
solitamente nel mio lab se non basta il degasatore a ultrasuoni si provano queste qui:
-altri 30 minuti in degasatore a ultrasuoni (nessun risultato)
-portare a ebollizione sottovuoto (nessun risultato)
-eliminare i filtri dal pescante (nessun risultato)
-aumentare l'agirtazione della fase (nessun risultato)
-raffreddare in frigo e riportare lentamente a t.amb. (nessun risultato)
in pratica qualunque cosa si faccia, in circa 30 mnuti si riformano grosse bolle nella fase e anche se non vengono aspirate direttamente dal pescante, si formano nel tubo...
COSA SI FA A QUESTO PUNTO?
grazie a tutti!
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Dr.Simone Cristoni
ISB srl
laboratori analisi chimiche
Analisi sostanze stupefacenti |
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Nik83
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
Inserito il - 08 aprile 2009 : 09:52:21
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problema: dopo un'ora sottovuoto a 27°C (normale temp. di questo lab.) penso che si concentri anche oltre a degasarsi... inoltre quasi sempre c'è circa l'80% di metanolo o acetonitrile nelle nostre fasi, quindi degasando in quel modo si ottiene una fase diversa da quella di partenza, per evaporazione...
(E' GIUSTO?) |
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simcrist
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Milano
62 Messaggi |
Inserito il - 09 aprile 2009 : 19:34:01
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Si in effetti potresti avere effetti di preconcentrazione indesiderati.
L'HPLC che utilizzi immagino che non abbia un sistema di degasaggio interno efficiente.
Potrei verificare l'esistenza di kit di degasaggio online.
Verifico e ti faccio sapere.
Citazione:
Messaggio inserito da Nik83
problema: dopo un'ora sottovuoto a 27°C (normale temp. di questo lab.) penso che si concentri anche oltre a degasarsi... inoltre quasi sempre c'è circa l'80% di metanolo o acetonitrile nelle nostre fasi, quindi degasando in quel modo si ottiene una fase diversa da quella di partenza, per evaporazione...
(E' GIUSTO?)
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Dr.Simone Cristoni
ISB srl
laboratori analisi chimiche
Analisi sostanze stupefacenti |
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Discussione |
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degasare correttamente una fase HPLC
Didattica e Relazioni
