risospensione DNA difficoltosa

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Autore

Discussione

Silvy
Nuovo Arrivato

Prov.: Bergamo
Citt�: Trescore Balneario

26 Messaggi

Inserito il - 06 luglio 2009 : 13:58:47

Ciao a tutti,

dopo estrazione di DNA con kit Promega (metodo del salting-out e non colonnine), spesso il pellet che ottengo � molto difficile da risospendere nonostante il volume di TE che uso per la risospensione sia ben pi� del doppio di quello indicato e nonostante la risospensione a 37�C O/N e anche il giorno seguente...Mi chiedo se sia il caso di aggiungere ulteriore tampone di risospensione, ma non vorrei rischiare di diluire troppo il DNA...Voi che ne dite?

mak_steon
Utente Junior

138 Messaggi

Inserito il - 06 luglio 2009 : 16:53:51

Se rimane proprio attaccato sul fondo io di solito lo gratto con il puntale, anche se rischi di perderne un pochino. Tieni presente comunque che il pellet che vedi non � tutto DNA, anzi la maggior parte � "sporco" che ti porti dietro dall'estrazione.
Nel caso che si stacchi bene, ma non si solubilizzi bene nel tampone, prova con un trattamento a 65 �C per 1-2 ore.
Io faccio entrambi su DNA batterico, non so su che DNA lavori te...
Ciao ciao

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 06 luglio 2009 : 17:23:11

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