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biolala
Nuovo Arrivato

Prov.: Pisa
Città: Pisa

16 Messaggi

Inserito il - 09 settembre 2009 : 18:07:12

Ciao a tutti!
Ho un problemi che associa il Laemmli con il Lowry...mi spiego meglio:
Ho risospeso il mio pellet di cellule in Laemmli (senza BBO) centrifugato e recuperato il sovranatante. Di questo ho voluto fare la determinazione delle proteine con il metodo Lowry. Il problema è che nel fare i calcoli mi vengono numeri negativi per il mio campione, ossia l'assorbanza del Laemmli è maggiore di quella del mio campione, di conseguenza, non posso avere la stima della concentrazione di proteine.
Qualcuno mi può aiutare?
Mi avevo detto che comunque il Lowry andava bene anche se usavo questo "buffer di lisi".
Grazie

biolala

darkene
Utente Junior

291 Messaggi

Inserito il - 10 settembre 2009 : 09:49:35

il Laemmli interferisce con il Lowry.
O lisi le cellule in altro buffer (senza detergenti e mercaptoetanolo), o vai per numero di cellule!

biolala
Nuovo Arrivato

Prov.: Pisa
Città: Pisa

16 Messaggi

Inserito il - 10 settembre 2009 : 11:14:51

Invece il Bradford??? Potrebbe andar bene?