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lā
Utente Junior
565 Messaggi |
 Inserito il - 03 agosto 2009 : 14:31:11
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ciao ragazzi! consiglio!
devo fare delle trasfezioni transienti su HeLa con Lipofectamine 2000 per poi fare delle immunofluorescenze. secondo voi posso fare la trasfezione delle cellule direttamente sul vetrino? sono un po' alle prime armi, quindi ogni dritta č ben accetta!
grazie!
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GFPina
Moderatore
Cittā: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 03 agosto 2009 : 17:18:31
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In genere si utilizzano dei vetrini apposta, su cui puoi coltivare le cellule, poi le fissi e le puoi utilizzare direttamente per l'immuno.
Si utilizzano Chambers Slides o CoverSlips:
- Chambers Slides: sono dei veri e propri vetrini sui quali sono applicate delle camerette di plastica (attaccate mediante silicone) che separano il vetrino in zone e creano un ambiente in cui puoi crescere le cellule. Poi basta rimuovere la cameretta (e il silicone) e utilizzarli come semplici vetrini.
- CoverSlips: sono dei supporti (in genere di plastica ma esistono anche di vetro) che vanno messi in altri contenitori, ad es petri e su cui fai crescere le cellule. I pių utilizzati sono quelli rotondi che metti nelle multiwell. Dopi di che li fissi, ci fai l'immuno e li monti su dei vetrini per vederli al microscopio.
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lā
Utente Junior
565 Messaggi |
Inserito il - 03 agosto 2009 : 19:20:32
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| si, io giā ho messo i vetrini nella petri. domani trasfetto...secondo te cambia qualcosa nel protocollo di trasfezione? |
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GFPina
Moderatore
Cittā: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 03 agosto 2009 : 19:27:00
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No non dovrebbe cambiare niente nel protocollo di transfezione!
Io l'ho fatto tanto tempo fa, ma non ho fatto nessun cambiamento.
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lā
Utente Junior
565 Messaggi |
Inserito il - 03 agosto 2009 : 19:37:13
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| ok, grazie mille! |
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virgiris
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Cittā: pozzuoli
19 Messaggi |
Inserito il - 14 settembre 2009 : 15:16:18
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perke dovrebbe cambiare qualcosa? io trasfetto sempre su cellule su vetrino, appunto per poi analizzare per immunofluorescenza, senza assolutamente variare nulla sul protocollo di trasfezione. ciaociao
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immufluorescenza
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