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 DNA ad un pH 6.8
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nuna
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Inserito il - 22 settembre 2009 : 21:22:00  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di nuna Invia a nuna un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti,
mi potreste dare una mano?
Devo titolare con un drug che si scoglie in tampone fosfato ad un pH 6.8 una sequenza di Dna lunga 21 mer.
Quando preparo le due soluzioni nel medesimo tampone il Dna sembra precipitare, infatti la soluzione è prima opalescente e poi c'è un residuo sotto l'eppendorf.
è possibile che il DNA in ambiente leggermente acido (pH 6.8) precipiti o si idrolizzi?
Grazie

Dionysos
Moderatore

D

Città: Heidelberg


1913 Messaggi

Inserito il - 22 settembre 2009 : 21:27:34  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dionysos  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Dionysos Invia a Dionysos un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Credo sia possibile che denaturi parzialmente, ma per precipitare
ci vuole qualcosa che lo faccia andare in salting out. Che ci mischi assieme?

Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)

Less Jim Morrison, more Sean Morrison!


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nuna
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48 Messaggi

Inserito il - 22 settembre 2009 : 21:48:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di nuna Invia a nuna un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ho un campione della primm, solido.
Ho preparato un tampone fosfato di potassio, ho aggiunto KCl, e portato a pH.
Ho sciolto un campione in 300 microlitri di tampone...ma...la soluzione non è limpida...
Ma un pH di 6,8 non mi sembra talmente acido da dare problemi al Dna...
Ditemi voi...
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Dionysos
Moderatore

D

Città: Heidelberg


1913 Messaggi

Inserito il - 22 settembre 2009 : 22:12:24  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dionysos  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Dionysos Invia a Dionysos un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Gli oligo della primm dovrebbero essere vortexati
molto bene, una volta risospesi. Hai fatto?

Comunque per piccoli oligo anche pH 6,8 potrebbe rompere le scatole

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nuna
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48 Messaggi

Inserito il - 23 settembre 2009 : 23:56:44  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di nuna Invia a nuna un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
alla fine ho risolto....
ho annilato il campione per una notte e la soluzione è risultata essere limpida...
grazie
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