Sto provando ad estrarre DNA da fegato di ratto congelato. Ho provato sia il kit Wizarg Genomics della Promega, si il kit Nucleospin con colonnina... I risultati sono stati insoddisfacenti! Alla lettura si osserva un picco non proprio bello a 260 nm e soprattutto alti valori anche a 230 nm. Su gel inoltre, si osserva una bella strisciata segno di materiale degradato! Qualche suggerimento???
La vita e i sogni sono fogli di uno stesso libro. Leggerli in ordine è vivere, sfogliarli a caso è sognare. (Arthur Schopenhauer)&
salve, sono alle prime armi e tra un po' assisterò per la prima volta ad un esperimento in vivo sul fegato di un ratto. Volevo chiedervi ma l'organizzazione anatomica,strutturale e funzionale del fegato del ratto è uguale a quella dell'uomo? grazie!
per la degradazione del DNA puoi fare poco o meglio, dipende da cme è stato congelato...a secco o in fisiologica o hanks? a -20 o -80°C o in azoto liquido? per quanto tempo? poi dipende anche da quanto era rimasto in giro i capione prima di essere prelevato... per quanto riguarda la tecnica di estrazione io ti consiglio il proteinasi K e fenolo cloroformio, un metodo classico che però nella maggiornaza dei casi si rivela la soluzione migliore! ciao!