Ciao, mi chiamo Santina. Sono un tecnico di laboratorio in servizio presso un laboratorio di medicina legale. Sono alle prese con la tecnica del WB. Vorrei che qualcuno mi aiutasse: Il sovranatante con le mie proteine, posso congelarlo? e poi posso riutilizzarlo per farlo correre nel gel? Ma devo ricentrifugarlo? Devo aggiungere nuovamente l'inibitore di proteasi? Grazie
dopo che hai ottenuto il lisato cellulare dal tuo campione cellulare, lo puoi tranquillamente congelare ( a -20 o meglio a -80). ancora meglio se, ovviamente dopo aver dosato il lisato, congeli delle aliquote già pronte per esser caricate, ossia a concentrazione nota e già bolliti insieme al TB, poichè contiene il B-mercaptetanolo che mentiene le proteine linearizzate e quindi più "stabili".
Ciao a tutti, è la prima volta che scrivo in questo forum ma avrei bisogno di sapere se qualcuno ha esperienze di wb per NFAT su estratto linfocitario!