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enrico.dioto
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 16 agosto 2012 : 10:49:10

Buongiorno,

Qualcuno ha esperienza con l'IHC per smad4 su tessuto ffpe?

Io sto provando vari protocolli estrapolati da quanto si torva in letteratura (Smascheramenti e diluizioni varie) ma con poche soddisfazioni.

Pertanto chiedo cortesemente di indicarmi (se proprio non � possibile postare il protocollo) un paio di linee guida (es pH6 piuttosto che 8 piuttosto che Tris EDTA per lo smascheramento ecc...)

Grazie

supererry
Nuovo Arrivato

Prov.: Torino
Citt�: Torino

82 Messaggi

Inserito il - 12 settembre 2012 : 20:39:43

Dopo i primi lavaggi, prova a fare un trattamento con metanolo freddo.
Preparati del metanolo e tienilo nel -20.
Quando e' freddo metti il metanolo sui campioni e poni i campioni in metanolo a -20gradi per 10 - 15 minuti.

Dopodiche' puoi continuare l'IHC normalmente.

Puoi anche provare a usare un blocking con maggiori % di NGS (se usi NGS) e triton.