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Gio94
Nuovo Arrivato



8 Messaggi
Inserito il - 17 novembre 2018 : 16:50:49  Mostra Profilo Invia a Gio94 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve,
volevo se possibile avere una delucidazione in merito all’elettroforesi allegata alla mail.

si tratta di un clonaggio di hGH tramite E.coliBL21(De3) e pET15-b

nel pozzetto 1: e.Coli listo
nel pozzetto M: i marker di peso molecolare noto
nel pozzetto 2: la proteina purificata con colonna cromatografica
nel pozzetto 3: la proteina hGH standard

e vedo che l’hGH ricombianante pesa circa 2,5kDa in più rispetto alla standard perché ha l’his-tag + 14aa all’N-Terminale.

la mia domanda è: La proteina ricombinante è quindi più pesante della standard estratta da un organismo perché ha l'his-tag?
perché fare questo confronto?

mi aiutate per favore a comprendere questa elettroforesi? grazie... quella a destra è un western blotting non mi serve, o meglio comprendendo l'uno comprendo anche l'altro

Immagine:

357,8 KB

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi
Inserito il - 17 novembre 2018 : 18:33:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Mi sono perso qualcosa...

Tu affermi:
Citazione:

vedo che l’hGH ricombianante pesa circa 2,5kDa in più rispetto alla standard perché ha l’his-tag + 14aa all’N-Terminale.


Poi domandi:
Citazione:

La proteina ricombinante è quindi più pesante della standard estratta da un organismo perché ha l'his-tag?


Non capisco la domanda...hai scritto la risposta un rigo prima.

Citazione:

perché fare questo confronto?

Puoi anche non farlo. Dipende da quello che vuoi dimostrare. Se vuoi dimostrare che la tua proteina ha un tag, puoi fare un'elettroforesi con una senza e far vedere la differenza di peso...
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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