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Cstef
Nuovo Arrivato

4 Messaggi

Inserito il - 11 aprile 2012 : 08:19:49

ciao, volevo sapere una volta � che ho un gel di agarosio costituito ad esempio da 16 campioni e 4 standar; elaboro la mia immagine in ImageJ e una volta che ho fatto il "label piks" vado in excel, i miei
standard che rappresentano concentrazioni diverse come li tratto? io avevo pensato di fare una retta di taratura con gli standard e poi usarne l'equazione per calcolare la concentrazione di DNA per� non mi tornanano i conti. Quello che io voglio sapere �: una volta che ho i miei dati in excel (ho area e percentuale che corrispondono hai picchi) per ottenere le concentrazioni in base hai miei standard come faccio a calcolarle?

qualcuno mi sa consigliare?

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 11 aprile 2012 : 08:47:24

Cos'� che non ti torna esattamente? Direi che il procedimento � corretto: fai una curva di taratura con i tuoi standard e poi trovi le concentrazioni dei tuoi campioni posizionandoli sulla retta di taratura.

Ovviamente tieni bene in mente che � una procedura solo semi-quantitativa.

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Cstef
Nuovo Arrivato

4 Messaggi

Inserito il - 11 aprile 2012 : 13:35:32

Citazione:
Messaggio inserito da chick80

Cos'� che non ti torna esattamente? Direi che il procedimento � corretto: fai una curva di taratura con i tuoi standard e poi trovi le concentrazioni dei tuoi campioni posizionandoli sulla retta di taratura.

Ovviamente tieni bene in mente che � una procedura solo semi-quantitativa.

quello che non sono sicura �: faccio la retta di taratura con le percentuali degli standard ok? e ottengo una equazione ad esempio y=155X+3244, poi se inseisco alposto della x la % del mio campione, in questo caso non mi torna la concentrazione secondo l'immagine che osservo!!
immagino che sia sbagliata la mia procedura ma vorrei capire come fare; quindi lei dice di confrontare le mie % ottenute con imageJ con la retta degli standard e basta?