Autore |
Discussione |
|
giuseppe sberla
Nuovo Arrivato
Prov.: SICILIA
Città: SIRACUSA
43 Messaggi |
Inserito il - 02 novembre 2010 : 20:24:42
|
Qualcuno sa dirmi un buon protocollo per IF per colorare filamenti di vimentina ?
Grazie
|
|
|
giuseppe sberla
Nuovo Arrivato
Prov.: SICILIA
Città: SIRACUSA
43 Messaggi |
Inserito il - 02 novembre 2010 : 23:24:31
|
anche un buon protocollo per IF standard ?! |
|
|
Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 03 novembre 2010 : 09:41:55
|
io faccio: fissazione in PFA4% per 10' a RT o in Metanolo freddo per 5' nel -20 (dipende dalle specifice dell'anticorpo). Poi, lavaggi in PBS, blocco di 20' con una soluzione di 0,5% BSA, o,1% saponin e 50mM NH4Cl. Poi procedo con l'Ab I diluito nella stessa soluzione di blocco, generalmente ON a 4°C; lavaggi e infine Ab II sempre 1:400 diluito in soluzione di blocco per 45'. Monto e via!!! |
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
|
|
|
giuseppe sberla
Nuovo Arrivato
Prov.: SICILIA
Città: SIRACUSA
43 Messaggi |
Inserito il - 03 novembre 2010 : 11:58:36
|
si grazie. potresti gentilmente scrivermi ogni passaggio del protocollo perchè lo devo studiare e così non ci capisco nulla. |
|
|
Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 03 novembre 2010 : 17:01:56
|
i passaggi sono esattamente quelli che ti ho elencato e sono già in ordine: 1 fissazione, 2 lavaggi, 3 blocking, 4 incubazione con l'ab I (non c'è bisogno di lavaggio prima), 5 lavaggi, 6 incubazione con l'ab secondario, 7 montaggio dei vetrini. |
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
|
|
|
_pietro_
Nuovo Arrivato
Città: Lund
104 Messaggi |
Inserito il - 04 novembre 2010 : 11:30:24
|
Citazione: Messaggio inserito da Iside
i passaggi sono esattamente quelli che ti ho elencato e sono già in ordine: 1 fissazione, 2 lavaggi, 3 blocking, 4 incubazione con l'ab I (non c'è bisogno di lavaggio prima), 5 lavaggi, 6 incubazione con l'ab secondario, 7 montaggio dei vetrini.
Non lavi dopo il secondario? |
|
|
|
Discussione |
|