| Autore |
Discussione |
|
|
Fabry.84
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
 Inserito il - 09 giugno 2011 : 12:11:50
|
Salve a tutti!!!
Sono nuovo da queste parti... spero di aver beccato la sessione giusta per chiedere aiuto.
Dovrei larorare con Lentivirus, cioè produrli ed usarli per infettare altre linee cellulari.
Prima di mettermi sotto una cappa biohazard (vecchio tipo), una camera coltura non protetta ed usano solamente camice e guanti, volevo sapere quali sono le misure di sicurezza per lavorare in tutta tranquillità.
Ho fatto un giro su internet ma si trovano direttive generiche... magari qualcuno di voi mi può spiegare meglio.
Importante: i tipi di virus infettano cellule umane!!! 
Grazie in anticipo e buon lavoro a tutti!!!
;)
|
|
|
|
|
Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 09 giugno 2011 : 12:36:57
|
Ciao,
una domanda preliminare che cambia radicalmente
la mia possibilità di rispondere alla tua domanda.
Devi manipolare:
> Lentivirus umani competenti per la replicazione
(= isolati di HIV "vivo" e vegeto)
> Lentivirus umani NON competenti per la replicazione
(=vettori lentivirali)
> Lentivirus non umani (=SIV, FIV, EIAV, ecc.) ma
pseudotipizzati per infettare cellule umane
? |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
|
 |
|
|
Fabry.84
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
Inserito il - 09 giugno 2011 : 19:55:21
|
Vettori lentivirali umani non competenti a replicare...
;) |
|
|
|
Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 09 giugno 2011 : 20:41:09
|
Bene, allora non ti servono DPI particolari ma ti basta un locale
di contenimento di tipo BSLII (cappa p2), che è il livello minimo.
Se manipoli vettore concentrato devi attenerti ad alcune norme di sicurezza
generale, del tipo indossare i doppi guanti e "inattivare" i puntali sporchi
in candeggina. Per il resto non serve niente di più di un camice e dei guanti.
Tutto questo è escluso se il tuo vettore lentivirale codifica per un oncogene
cellulare o virale o fortemente sospettato tale, anche qualora fosse non attivato
(dato che la trascrittasi inversa di HIV non è famosa per la sua fedeltà...).
In quel caso il vettore diventa agente biohazard di classe III. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
|
|
|
|
Fabry.84
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
Inserito il - 10 giugno 2011 : 13:25:04
|
Il mio vettore serve ad overesprimere un famoso oncogene...
quindi devo considerarlo biohazard III???
La cappa P2 non basta?
Scusa se chiedo ulteriori chiarimenti ma la cosa mi preoccupa un pochino!!!
 |
|
|
|
Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 10 giugno 2011 : 14:19:25
|
Il tuo vettore ha un envelope pantropico ? VSV-G? oppure ampho?
E' la seconda determinante fondamentale per il calcolo del rischio.
Informati bene all'ufficio prevenzione e protezione del tuo istituto:
credo che per maneggiare quel vettore tu debba seguire delle norme
diverse, molto probabilmente dovrai lavorare in condizioni tali che
minimizzino l'esposizione a te e ai tuoi colleghi. Oppure utilizzare una P3.
|
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
|
|
|
|
Fabry.84
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
Inserito il - 10 giugno 2011 : 21:53:12
|
L'envelope è Human... devo produrre il virus in 293 LT cotrasfettando più vettori: per la polimerasi, per il capside e per l'envelope + il dna del costrutto (un oncogene).
L'envelope, se non sbaglio dà la specificità di infezione; ho letto che con questo virus hanno infettato linee umane di polmone.
Quindi in 293 LT si costruisce il virus che preleverò dal supernatante e ci infetterò altre linee cellulari.
Il virus non è quindi in grado di replicare nelle cellule ospiti... ma si integrerà nel genoma cellulare dando una espressione elevata dell'oncogene.
Spero di esser stato chiaro... forse non mi ero spiegato a sufficenza nei messaggi precedenti.
Grazie ancora. |
|
|
|
Fabry.84
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
Inserito il - 20 giugno 2011 : 17:47:13
|
| C'è nessunoooooooooooo!!! |
|
|
|
Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 20 giugno 2011 : 19:36:05
|
Mi sembra di averti già risposto: vale quello che ti ho detto.
Ovvero
Citazione:
Informati bene all'ufficio prevenzione e protezione del tuo istituto:
credo che per maneggiare quel vettore tu debba seguire delle norme
diverse, molto probabilmente dovrai lavorare in condizioni tali che
minimizzino l'esposizione a te e ai tuoi colleghi. Oppure utilizzare una P3.
A ragion veduta visto che il tuo envelope estende il suo tropismo alla specie umana. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
|
|
|
|
Fabry.84
Nuovo Arrivato
6 Messaggi |
Inserito il - 21 giugno 2011 : 10:21:07
|
Scusami non avevo capito bene...
Avevo visto le domande all'inizio della tua risposta e pensavo che la stessa fosse incompleta.
Mi informerò all'ufficio prevenzione.
Grazie ancora e buon lavoro!!!
;)
|
|
|
| |
Discussione |
|
Precauzioni uso 
Didattica e Relazioni
