Analisi mediante Southern blot di sequenze genomiche

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Telomerico
Nuovo Arrivato

15 Messaggi

Inserito il - 21 settembre 2013 : 20:51:42

Salve, non riesco bene a capire come si costruiscono le sonde che andranno ad ibridare il DNA frammentato; come si arriva a comprendere la disposizione dei siti di restrizione con l'utilizzo di sonde all'interno di un genoma? In base alla corsa elettroforetica dei marcatori di peso molecolare si possono calcolare le dimensioni dei frammenti che andranno ad ibridare con la sonda e dalle dimensioni dei frammenti si pu� arrivare a costruire la mappa di restrizione, ma come si calcolano effettivamente, potete farmi un esempio pratico? grazie.

Telomerico
Nuovo Arrivato

15 Messaggi

Inserito il - 23 settembre 2013 : 18:11:10

come si costruisce una mappa di restrizione con questa tecnica, pi� semplicemente?

Gr�n
Utente Junior

220 Messaggi

Inserito il - 03 novembre 2013 : 10:57:10

Come si calcolano effettivamente, intendi, come fanno a formulare un primer che abbia una sequenza esattamente complementare a quella della regione bersaglio?

Immagino che per poter fare Biologia Molecolare su una qualsiasi regione di DNA, bisogni sapere la sua composizione in bp - e quindi sia necessaria una qualche strategia preventiva di sequenziamento.

E' il drawback di tutte le tecniche d'ibridazione - l'ibridazione ti permette d'essere specifico e preciso, ma se non conosci la sequenza, la specificit� viene meno.

O almeno credo sia cos�. xD