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hurricane86
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Inserito il - 15 settembre 2010 : 11:44:49

Buongiorno a tutti ragazzi, vi scrivo perch� ho un dubbio terrificante (mi rimanderei al primo anno di corsa)
A partire da un plasmide, dopo l'opportuna linearizzazione, ho effettuato la trascrizione con polimerasi T7. Il cDNA che ho fatto trascrivere � lungo oltre le 6mila bp per cui la prof mi ha consigliato di fare un gel denaturante per controllare se la sintesi � corretta.
Ho eseguito la corsa su un gel di agarosio e formaldeide e qui casca l'asino: Il mio RNA � intensissimo ma � la met� di quello che dovrebbe essere. (ed � accaduto per ben due volte)
il mio dubbio �: SEMBRA la met� perch� il marker che ho usato � un DNAladder (quindi se non erro un dsDNA), mentre il mio RNA � a singolo? o qualcosa non ha funzionato nella trascrizione?

Grazie a tutti........vado ad infilarmi in una lezione di biochimica del primo anno

Think I'll lose my mind if I don't find something to pacify

....muore lentamente chi non esplora cio che non conosce....