qualcuno può gentilmente inviarmi un metodo per colorare i lipidi in tessuto muscolare? io ho muscoli di topo congelati in azoto liquido e subito posti a -80°. grazie
Credo che un metodo per visualizzare i lipidi sia quello dell'oil red O. Ti mando di seguito il potocollo che ho usato per i vetrini. Tieni conto che alcune ditte come la DIAPATH vendono un kit già pronto.
Saluti
Domenico
OIL RED O Reazione istochimica per la colorazione dei lipidi
SOLUZIONI:
- STOCK SOLUTION - Oil Red O (C.I. 26125) - Stock Solution 0,5 g in 500 ml Isopropanolo (scaldare a 56° C x 30-60 min - raffreddare) - Filtrare
WORKING SOLUTION 6 parti di Stock Solution 4 parti di acqua distillata
METODO
1. sciacquare le fette in acqua 2. colorare con la workin solution per 5-20 min 3. lavare in acqua di rubinetto 4. passare in acqua distillata 5. immergere in Ematossilina 1-5 min 6. lavare con acqua di rubinetto 7. passare in acqua distillata 8. montare con glicerina 1% o altro montante acquoso