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Dacrua
Nuovo Arrivato

Citt�: Lucca

41 Messaggi

Inserito il - 29 dicembre 2008 : 13:30:49

Avrei bisogno di un chiarimento...ma sul fondo delle piastre da ELISA, vengono prima fatti aderire gli Ab, e poi si mette il siero da saggiare? Grazie mille a tutti

= Francesca =

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 30 dicembre 2008 : 21:45:06

Dipende da cosa vuoi vedere!
Se vuoi vedere un antigene presente nel siero allora fai aderire alla piastra gli anticorpi (che riconoscono quel determinato antigene) e poi metti il siero, in questo modo l'antigene se presente si legher�.
Se invece vuoi vedere la presenza di anticorpi nel siero, fai aderire alla piastra l'antigene, metti il siero e gli anticorpi se presenti si legheranno.

Fai attenzione se vai a cercare qualche cosa riguardo all'ELISA su internet sono presenti "molti" errori, wikipedia compresa.

Innanzitutto la distinzione tra test ELISA diretto e indiretto:
diretto: l'anticorpo primario � direttamente legato all'enzima che fa avvenire la reazione colorimetrica
indiretto: l'anticorpo primario viene riconosciuto da un anticorpo secondario a cui � legato l'enzima

L'ELISA a sandwich � il caso in cui hai l'anticorpo legato alla piastra, a questo si legher� l'antigene e poi si fa legare un altro anticorpo che lega l'antigene dall'altra parte (questo � un anticorpo "primario" ) poi puoi avere il caso diretto se l'anticorpo � legato all'enzima o indiretto se utilizzi un anticorpo secondario che si lega a questo anticorpo primario.
Questo � uno schema riassuntivo: