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mari11
Nuovo Arrivato
Prov.: Catania
14 Messaggi |
 Inserito il - 10 febbraio 2006 : 13:41:01
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ciao a tutti! 
la marcatura enzimatica come consente la rivelazione?
è necessaria la presenza di un substrato nel mezzo di reazione che si trasforma in un prodotto colorato o fluorescente?
quando mi viene detto (x es) che la fosfatasi alcalina catalizza l'eliminazione di un gruppo fosfato la rivelazione come si fa?
e con la perossidasi che succede?
mi fate capire?
e la differenza con gli immunodosaggi amplificati che usano la fosfatasi alcalina dove sta?
mamma mia qst biochimica applicata... troppe cose e nessun concetto che viene approfondito.. a volte mi sembra di fare libera interpretazione !
help me please..
 mari
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 11 febbraio 2006 : 00:05:55
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si, hai qualcosa che fa fluorescenza o colore.
Ad es. esistono substrati che vanno da giallo a rosso (o qualcosa di simile) x la fosfatasi alcalina e per la perossidasi ci sono composti che emettono fluorescenza.
Purtroppo al momento non mi ricordo i nomi dei substrati se vuoi posso cercare. |
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Ra1D
Utente Junior
Prov.: Bergamo
Città: Treviglio
174 Messaggi |
Inserito il - 11 febbraio 2006 : 00:23:47
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Eccoti un paio di copia-incolla da mie vecchie relazioni in cui c'era la fosfatasi alcalina.
Citazione:
La fosfatasi alcalina è un enzima che catalizza l’idrolisi di monoesteri del fosfato nella seguente reazione: R-O-PO3H- + H2O -> R-OH + H2PO4-
Le fosfatasi alcaline sono le fosfato idrolasi che hanno attività massima ad un pH relativamente alto (> 7.0).
L’attività della fosfatasi alcalina viene determinata con un metodo spettrofotometrico in continuo. Il migliore substrato è il 4-nitrofenilfosfato, che è un substrato artificiale e cromogenico e in vitro viene idrolizzato dalla fosfatasi alcalina a 4-nitrofenolo, un composto che in ambiente alcalino sviluppa una colorazione gialla. Ciò consente di seguire l’attività enzimatica, registrando la comparsa del 4-nitrofenolo liberato nell’unità di tempo alla lunghezza d’onda di 400nm.
Con la perossidasi invece c'è un substrato chemioluminescente.
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...e vicinissimo al mio sapere si accampa la tenebra della mia ignoranza... |
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mari11
Nuovo Arrivato
Prov.: Catania
14 Messaggi |
Inserito il - 11 febbraio 2006 : 15:48:56
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grazie chick x la disponibilità ma l'esempio di Ra1D è sufficiente! 
grazie anche a te Ra1D!
alla prox |
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