devo disegnare un fw e un rev.al primo devo mettere il sito di restrizione per EcoRI (g/aattc); al rev quello per NotI (gc/ggccgc). Supponendo una sequenza da amplificare che comincia 5'-3' ggtgaccatgtg............... e finisce aagtttgctggc, come scrivo i primer?devo aggiungere qualche base per mantenerli in frame con una proteina di fusione presente in un vettore? Grazie