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Autore Discussione  

andrea_newuser
Nuovo Arrivato



37 Messaggi
Inserito il - 27 maggio 2009 : 16:36:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di andrea_newuser Invia a andrea_newuser un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao, in lab a un mese dalla fine del mio tirocinio si è posto il tal problema: sarà meglio usare la formaldeide o la paraformaldeide per fissare le cellule sul vetrino? oppure: ma 15 minuti in fissativo non saranno troppi?

Poi ho provato ad usare vetrini normali, vetrini ricoperti ma non ho visto gran che differenza.

Che mi dite? :)

GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi
Inserito il - 27 maggio 2009 : 16:50:38  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Io uso parafolmaledeide 4% in PBS o acetone freddo per 3-5min.
(15 mi sembrano tanti in effetti!)

Comunque nella sezione protocolli trovi anche un protocollo: http://www.molecularlab.it/protocolli/protocol.asp?id=22
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Iside
Utente Attivo

Iside_paradise

Città: Napoli


1375 Messaggi
Inserito il - 27 maggio 2009 : 17:06:23  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Iside  Invia a Iside un messaggio Yahoo! Invia a Iside un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
paraformaldeide al 4%, per 10 minuti. io in genere faccio così
...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 27 maggio 2009 : 17:14:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Beh, non credo che lasciare per troppo tempo sia un problema. Alla fine quando fai il fissaggio di tessuti li puoi conservare per mesi nella PF senza problemi.
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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi
Inserito il - 27 maggio 2009 : 17:23:43  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da chick80

Beh, non credo che lasciare per troppo tempo sia un problema. Alla fine quando fai il fissaggio di tessuti li puoi conservare per mesi nella PF senza problemi.

Beh si io pensavo di più all'acetone, per la PFA magari no... io comunque i vetrini con le cellule li tengo in PBS dopo la fissazione non in PFA.
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 27 maggio 2009 : 17:33:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Sì, in effetti l'acetone potrebbe essere più problematico.
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memole
Utente Junior

memole

Prov.: Brindisi
Città: brindisi


577 Messaggi
Inserito il - 27 maggio 2009 : 19:36:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di memole Invia a memole un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Da me si usa paraformaldeide al 10% per 10 min e vetrini gelatinati
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Gst
Utente Junior


Prov.: Roma
Città: Ariccia


143 Messaggi
Inserito il - 30 maggio 2009 : 19:02:03  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Gst Invia a Gst un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
A me hanno fatto fissare in PFA 4% per 30 min addirittura.

Poi faccio 2 lavagg con PBS e conservo con PBS a +4°C o "a secco" a -20°C.

Che ne pensate?
Ascoltami con gli occhi...
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 30 maggio 2009 : 19:05:09  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
If it's not broken don't fix it
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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi
Inserito il - 31 maggio 2009 : 01:25:46  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da chick80

If it's not broken don't fix it


pun intended? (anche qui???)

(traduzione: gioco di parole)
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 31 maggio 2009 : 09:00:29  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ahahahaahah giuro che non l'avevo notato!!!!!!!!!!!!!!!!
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