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lella
Nuovo Arrivato
Città: Melfi / Teramo
14 Messaggi |
 Inserito il - 01 aprile 2006 : 17:53:14
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Ciao a tutti!!!
Sono alle prese con gli appunti del mio prof  ma non riesco a capire bene la differenza tra hot star pcr e booster pcr. qualcuno sa darmi una mano?
Grazie 
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AleXo
Moderatore
Prov.: Estero
Città: San Francisco, California
1550 Messaggi |
Inserito il - 01 aprile 2006 : 20:18:22
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la prima è un metodo per ridurre l'aspecifico in una rezione di pcr.
Nell'hotstart uno o + componenti di rezione sono separati prima che inizino i cicli di amplificazione, questo perkè ad es. la Taq è processiva anche a basse temperature.
Lo si fa con delle speciali cere commerciali ad hoc, uno dei metodi + comuni prevede l'aggiunta di questa "wax beads" al mix di pcr, che galleggiano e solidificano in cima; su questo strato si aggiunge poi una pol termostabile nel suo buffer. Al primo primo step di denaturazione (l'hot start) la cera fonde permettendo il contatto dei vari componenti fra loro.
la booster pcr è un altro metodo per aumentare le rese quanto il tuo template di partenza è molto diluito,sinceramente non ne so molto e non mi pare molto diffusa.
E' una reazione bifasica, dove nel primo step si lavora con degli eccessi di primer che poi vengono normalizzati nel secondo.
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lella
Nuovo Arrivato
Città: Melfi / Teramo
14 Messaggi |
Inserito il - 02 aprile 2006 : 10:10:50
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Grazie mille per l'aiuto!!
In effetti nella hot star non riuscivo a capire come si potesse aggiungere la Taq dopo il primo step di denaturazione!!
Grazie ancora!!! |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
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lella
Nuovo Arrivato
Città: Melfi / Teramo
14 Messaggi |
Inserito il - 02 aprile 2006 : 11:11:27
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Ops! |
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booster e hot star PCR
Didattica e Relazioni
