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ale5
Nuovo Arrivato
35 Messaggi |
 Inserito il - 01 luglio 2009 : 21:55:10
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ciao a tutti,
io ho un problema pratico di laboratorio: ho una soluzione e non so se contiene dna o rna, come faccio a determinare di che acido si tratta?
grazie
ale5
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elving
Utente Junior
240 Messaggi |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 02 luglio 2009 : 00:00:14
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Citazione:
Messaggio inserito da elving
con lo spettrofotometro!
guarda qui: http://www.molecularlab.it/principi/calcoli-laboratorio/letture-spettrofotometro.asp
Assolutamente no!
Il metodo spettrofotometrico ti permette di calcolare la concentrazione di DNA o RNA ma devi sapere cosa stai leggendo, lo spettrofotometro ti darà un valore di assorbanza e l'unica distinzione è nei calcoli!
Se hai una soluzione mista o una soluzione che non sai cosa contenga l'unico metodo è quello colorimetrico, si utilizzano delle soluzioni che formano dei complessi colorati specifici per DNA o RNA.
Ne avevamo parlato qui: http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=7950
Altrimenti puoi trattare con DNasi se si degrada era DNA (o viceversa con RNasi)... scherzo ovviamente!!!  |
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ale5
Nuovo Arrivato
35 Messaggi |
Inserito il - 03 luglio 2009 : 09:55:17
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| ok grazie... ma se io non avessi questi due "coloranti" come potrei fare?? cerco un metodo molto terra-terra di fare ciò!! |
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RM
Nuovo Arrivato
115 Messaggi |
Inserito il - 03 luglio 2009 : 10:04:13
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| PCR per beta actina di una aliquota con/senza trascrizione inversa? |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 03 luglio 2009 : 10:06:09
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| Beh... io li comprerei, non sono così costosi, soprattutto la difenilammina (13euro per 250g). L'orcinolo è un pochino più costoso (20 euro per 5g), ma non credo ne serva tantissimo. |
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mikymiky
Nuovo Arrivato
Prov.: Brescia
Città: lonato
45 Messaggi |
Inserito il - 06 luglio 2009 : 23:32:10
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| io avevo fatto un corsa in Agilent Bioanalyzer! Ti quantifica l'acido nucleico in unità di fluorescenza, e in base al n° di basi vedi subito cos'hai! (l'RNA massimo ti dà picchi fino a circa 2500 nt, corrispondenti ai 23 S) |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 07 luglio 2009 : 21:00:26
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Citazione:
Messaggio inserito da mikymiky
io avevo fatto un corsa in Agilent Bioanalyzer! ...
Beh non credo che sia proprio l'opzione più economica a meno di non avere già lo strumento!
Con difenilammina e orcinolo mi sembra il metodo più rapido e conveniente.
Puoi anche come suggeriva RM fare una PCR per un gene abbastanza espresso, o magari 2 PCR diverse che ti diano prodotti di grandezza diversa se hai DNA o RNA.
O alla peggio seminare su gel una aliquota così com'è una digerita con RNasi e una digerita con DNasi. |
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Discussione |
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DNA o RNA??
Didattica e Relazioni
