vorrei testare l attività di una certa proteina fosfatase su un enzima. Una volta precipitato l enzima con degli anticorpi,vorrei passarlo su una colonna che trattenga tutti i fosfati liberi in modo che nn alterino il mio risultato. qualcuno ha idea di come potrei concepire la colonna?grazie
In teoria dovrebbe bastare una normale colonna a scambio anionico, derivatizzata, ad es. con gruppi ammino. La colonna, ovviamente, tratterrebbe sia i fosfati liberi che le proteine fosforilate, ma li eluirebbe a tempi diversi.
So, inoltre, che esistono dei kit per arricchire in proteine fosforilate una miscela (ad es. so che li produce la BD Bioscience), magari ti potrebbero essere utili.