Ciao a tutti, devo indurre l'espressione di una proteina in cellule competenti batteriche di E coli usando il vettore pGEX-4T3 che ha una ORF di tipo 2 ma io al momento ho un vettore pGEX-4T1 che ha una ORF di tipo 3. Qualcuno sa dirmi se posso usare ugualmente questo tipo di vettore e la differenza che può esserci sul tipo di espressione della mia proteina se utilizzo vettori con ORF diverse da quella richiesta. che differenza c'è tra una ORF di tipo 3 e una di tipo 2?? grazie
Un ORF di tipo 2 comincia con la t (dell'atg iniziale), quella di tipo 3 con g. Per cui se non usi quella giusta o non cambi il frammento da inserire non avrai una lettura corretta e non otterrai la proteina.