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eleonora flyd
Nuovo Arrivato

4 Messaggi

Inserito il - 23 ottobre 2009 : 15:45:54

Salve a tutti!
Sono alle prime armi in un laboratorio straniero alle prese con trasfezioni di plasmidi plvthm nel quale verra' immesso la porzone genica della vinculina gia' programmata per il knock down..

Ho diversi dubbi!
Ad esempio cosa avviene quando il plasmide e' integrato nella cellula! Si fonde con il genoma?
In pratica la vinculina che ottengo come sara'? Utilizzo shvinc..
Oppure con il knock down non verra' sintetizzata? Ma allora cosa serve individuarla attraverso la immunofluorscenza?

C'e' qualcuno che puo' darmi qualche delucidazione in merito??

Grazie mille!!!!

Dionysos
Moderatore

Città: Heidelberg

1913 Messaggi

Inserito il - 26 ottobre 2009 : 15:15:43

Ciao, non ho capito bene cosa stai facendo:
stai clonando un shRNA per il knockdown della vinculina?
Oppure un costrutto omologo per il knock-OUT della vinculina?

Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)

Less Jim Morrison, more Sean Morrison!

eleonora flyd
Nuovo Arrivato

4 Messaggi

Inserito il - 30 ottobre 2009 : 12:22:57

Sto eseguendo delle clonazioni di shrna per il knockdown della vinculina. Potresti dirmi la differenza fra i due?

Sto eseguendo lo stesso esperimento di trasfezione in diversi giorni,ma i significato e' quello di immortalare la proteina che altrimenti verrebbe persa nell'arco di giorni?

Potresti darmi qualche delucidazione in merito a tale procedimento!? thanks