problemi di fosforilazione

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DeboraGe
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 13 novembre 2009 : 14:58:30

Ciao a tutti.
Avrei bisogno del vostro aiuto per rispondere a un quesito per me ostico..La domanda � questa, mi � stato chiesto di cercare un anticorpo per western blott in grado di farmi capire se una proteina � fosforilata o no.
Dunque, a me � venuto in mente che sono le serine che vengono fosforilate, dunque dovrei cercare un anticorpo contro una delle serine della proteina in questione. E poi? Dovrei avere due anticorpi contro la stessa sequenza contenebte la serina in questione, uno per la forma fosforilata e uno per quella non fosforilata....gi� ma esistono anticorpi del genere?
Oppure c'� un altro modo per capire se una proteina � fosforilata che non so?

Giuliano652
Moderatore

Prov.: Brescia

6941 Messaggi

Inserito il - 13 novembre 2009 : 15:38:55

esistono anticorpi contro le proteine fosforilate e contro le proteine non fosforilate, se devi farlo con i western ne fai due, uno con gli anticorpi antiproteinaP e uno con gli anticorpi antiproteina, quello che riesce � quello giusto

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Iside
Utente Attivo

Citt�: Napoli

1375 Messaggi

Inserito il - 13 novembre 2009 : 15:54:13

Citazione:
Messaggio inserito da DeboraGe

Dunque, a me � venuto in mente che sono le serine che vengono fosforilate

beh, anche le treonine e le tirosine sono fosforilabili!

...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 13 novembre 2009 : 17:46:11

Ad ogni modo puoi anche avere anticorpi specifici per un singolo aa fosforilato (es. se la tua proteina pu� essere fosforilata in pi� posizioni puoi avere anticorpi diversi per le diverse posizioni).

Se l'anticorpo per la tua specifica proteina fosforilata non esiste, esistono comunque degli anticorpi anti Ser-P o anti Tyr-P, con cui puoi fare una IP e poi proseguire con un Western usando un anticorpo che riconosca la tua proteina.

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