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Dany°
Nuovo Arrivato
Città: Pescara
34 Messaggi |
 Inserito il - 17 marzo 2010 : 16:27:37
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Ciao a tutti,
qualcuno sa dirmi quali siano attualmente le tecniche migliori per rilevare l'eventuale presenza di HSV (tipo I e II) in colture di cellule staminali?
Ho letto che nella maggior parte dei casi la ricerca viene effettuata tramite PCR classica, RT o Real Time, ma vorrei sapere se esistono altri metodi affidabili e se eventualmente avete delle dritte sul protocollo.
Grazie infinite
Dany
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"Non ho paura del clamore chiassoso dei violenti, ma del silenzio spaventoso delle persone oneste" M.L.King |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 17 marzo 2010 : 16:58:55
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Considerando che quando lavori con cellule staminali umane,
in genere, il materiale biologico di partenza è limitato,
direi che difficilmente potrai trovare approcci migliori
della PCR (per HSV, poi, ci sono saggi molto rapidi ed efficienti
che ti permettono di individuare il virus anche quando è latente).
So che HSV è uno dei virus più semplici da far replicare in
linee cellulari, per cui se l'infezione nelle staminali è
produttiva immagino che si possa prelevare il medium
condizionato dalle stesse (sempre che si possano coltivare a
lungo: che staminali sono?) e trasferirlo su linee di fibroblasti
per diluizione endpoint. Lì poi puoi fare immunofluorescenze,
western, northern e tutto quello che ti pare, dato che avrai
cellule in abbondanza da cui si sarà replicato virus in abbondanza. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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Dany°
Nuovo Arrivato
Città: Pescara
34 Messaggi |
Inserito il - 01 aprile 2010 : 12:49:53
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Ciao Dyonios, e grazie mille.
Sono staminali neurali e quindi si, possono essere coltivate a lungo.
Direi che l'approccio che mi hai suggerito potrebbe funzionare, grazie infinite! :) |
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ricerca HSV in colture cellulari
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